Предмет и задачи микробиологии, этапы развития, значение микробиологии для врача Микробиология от греч micros-маленький и bios-организм наука которая изучает микроорганизмы маленьких размеров менее 0,1 мм, систематизирует, выясняет свойства, а также вопросы наследственности, изменчивости. Микроорганизмы самая древняя форма организации жизни на земле около 3-4 млрд. В то же время наиболее значимая и разнообразная часть живого мира. Количество их на планете 10 30. Они везде есть в космосе, на всех объектах внешней среды, растениях, заселяют организм животных насекомых, человека. Значение микробов в природе: 1. Участие микробов в круговороте веществ (азота, углерода, фосфора, серы) 2. Влияние микроорганизмов на почву (структуру, плодородие). Широко используются для обеспечение жизнедеятельности человека (получение хлеба, вина, пива, молочнокислых продуктов). Получение белкового корма. Получение медицинских препаратов Биотехнология - использование биологических объектов для получения полезных для человека веществ (кислоты, спирты, кормовые белки, антибиотики, гормоны, заменители крови, вакцины и т.д.) Главные биологические объекты БТ: бактерии, вирусы, клетки человека, растений. Мир микробов клеточныеВнеклеточныепрокариоты - бактерии - арихибактерии (самая первая форма бактерий, для человека не имеют значение) - синезеленые водорослиэукариоты - простейшие - грибывирусыприоныВироиды Отличие прокариот от эукариот. ПрокариотыЭукариотыРазмер1-10 мкм10-100 мкмВозможность анаэробного дыханиявозможноНевозможноМембранные структурыОтсутствуютПрисутствуютГенетический материалМолекула ДНК в дисперсном состоянии, не имеет ядерной мембраныИмеют истинное ядро т.к. Генетический материал ограничен ядерной мембраной.Форма генетического материалаКольцеваяХромосомаБелки гистоныОтсутствуютПрисутствуютТип размноженияПростое бинарное делениеМитоз, мейозСинтез белкаНа рибосомах (70S)Рибосомы (80S)ЭПСНетЕстьОсобенности клеточной стенкиИмеет особые белки пептидогликаны Нет стероловЕсть хитин, целлюлоза и т.д. Есть стеролы Вирусы это неклеточная форма, генетический материал представлен РНК или ДНК. Не имеют собственного метаболизма. ![]() Факторы, влияющие на здоровье человека: Здоровый образ жизни. - презентация. Презентация была опубликована 5 лет назад пользователемlyceum-179.narod.ru ВКонтакте Facebook Одноклассники Мой Мир LinkedIn Google+. Фрагменты из презентации«Здоровье человека – это состояние полного физического, духовного и социального благополучия, а не только отсутствие болезней и физических недостатков.» Духовное здоровье; Физическое здоровье; Социальное здоровье. Факторы, влияющие на здоровье. Абсолютные внутриклеточные паразиты на генетическом уровне. Могут жить только внутри живой клетки изменяя ее геном. Присуща наследственность, изменчивость. Прионы или белки PrP Sc -возбудители конформационых болезней. Не имеют наследственного материала, являются инфекционными агентами (неживые). Pr cell отличаются конформацией. Находятся в клетке, выполняют роль передачи импульсов, изменив конфигурацию становятся вредными и вызывают губчатые энцефалопатии. Прионы передаются с пищей, препаратами полученными от животных. Вироиды нуклеиновые кислоты без белка. Они мигрируют, перемещаются вызывают болезни у растений и пока неизвестно что бы они вызывали болезни у человека. История развития микробиологии. Эмпирический период. Левенгук (1632-1723) Рассматривал в стекла и увидел организмы, которые назвал animalcuta viva т. Левенгук является основоположником микробиологию. Он создал оптический прибор, который давал увеличение 160, 300 раз. В этот период были открыты возбудители многих болезней (чумы, трихомонады, возбудитель сибирской язвы). Дженнер (1740-1823) предложил метод натуральной вакцинации (vacca - корова) для борьбы с натуральной оспой (перенос зараженного материала коровы к человеку). Пастеровский период. Пастер (1822 - 1895). Первое открытие то что брожение не является только химическим процессом, оно вызывается различными группами микроорганизмов (молочнокислое - молочнокислыми бактериями, спиртовое - дрожжевыми клетками, уксуснокислое). Второе это открытие анаэробиоза - жизнь в отсутствии кислорода. Одновременно открыл микробы анаэробы. Провел опыты по самозарождению и доказал, что самозарождение не существует, а порча продукта связана с попаданием в этот продукт из воздуха микроорганизмов. Пастер доказал, что виновником гнойных послеоперационных осложнений являются патогенные стрептококки. В основе этого Листер предложил обработку ран карболовой кислотой это положило начало эры асептики и антисептики. Пастер установил природу гниения, то что в нем учувствуют Clostridium. Так же предложил превращение патогенного микроорганизма в непатогенный т.е. Способ получение вакцин (получил против куриной язвы, бешенства). Вакцину против бешенства он изобрел взяв зараженный мозг собаки и заразил этой тканью кроликов введя в субдуральное пространства. Кролики заболели бешенством и погибли. И пересеял их мозговую ткань другим кроликам и т.д. Пастер затем заметил, что новая партия кроликов заболевает быстрее чем предыдущие. Таким образом он получил фиксированный вирус бешенства, который был высоко патогенен у кроликов. Пастер ввел этот фиксированный вирус собаке, человеку (другому биологическому виду) и т.д. И другим видом (подкожно) и увидел, что собаки не заболели бешенством, а так же были защищены от дикого вируса. Первыми пациента укушенными волком были смоленские крестьяне (18 человек) 15 из них выжили. Роберт Кох открыл возбудителя туберкулеза, холеры, получил туберкулин. Предложил методы выделение чистой культуры, окраски микроорганизмов Сформулировал триаду признаков триада Генле-Коха для установление этиологической рполь для любого микроорганизма. Включает три признака: Ø возбудитель должен быть выделен в чистой культуре, Ø возбудитель должен быть выделен только при этом заболевании и ни при каком другом, выделятся на чистой культуре Ø чистая культура должна вызывать эксперементальную инфекцию В этот период открыты (гонококки, возбудитель брюшного тифа, клепсиелы, эшерихии, палочка дизентерии). Иммунологический период. Мечников открыл фагоцитоз чвляется основоположником клеточной теории иммунитета. Эрлих открыл антитела, гуморальная теория иммунитета. Разработал методы химиотерапии. Ивановский открытие вируса (табачная мозаика). Разработаны антибиотики. Молекулярно-генетический период. Начало вторая половина 20 века до сих пор. Стало возможным изучение генома микроорганизмов открыты прионы, открыты новые вирусы (ВИЧ, SARS) открыты новые антигены - опухолевые, гистосовместимости системы HLA (человеческие лейкоцитарные антигены), расшифровано строение антител или иммуноглобулина, получены клеточные структуры ткани, получены рекомбинантные бактерии, вирусы содержащие генетические материал 2 вирусов. Созданы гибридомы - клетки, которые получены слиянием 2 типов клеток, и гибридомы с помощью которых получают моноклональные антитела. Открыты имуномодуляторы - вещества влияющие на имунокомпетентные клетки. Разработаны новые способы диагностики инфекционных заболеваний и других заболеваний методами ИФА, РИА, ПЦР. Развитие биотехнологий, т.е. Использование микробных клеток для производства многих препаратов, гормонов, цитокинов. С открытием новых инфекций отмечается реставрация старых патогенов таких как возбудитель сифилиса, туберкулеза, дизентерия, гонорея. Разделы медицинкой микробиологии: Ø паразитология Ø микология Ø иммунология В завистимости от целей и задач: Ø медицинская микробиология Ø промышленная Ø сельскохозяйственная Ø ветеринарная Ø пицевая Медицинская в зависимости от цели и задач: Ø клиническая - изучает условнопатагенные микроорганизмы вызывающие неспецифические инфекционные заболевания с локализацией в разных органах и тканях, с которыми сталкиваются в врачи любой профессии (гнойно-воспалительные процессы) и патогенные, которые вызывают конкретные инфекционные заболевания (чума, холера, дизентерия). Ø санитарная микробиология - изучает распространение в окружающей среде, наличие в объектах таких УПМ и ПМ, влияние их на здоровье населения Ø фармацевтическая - микрофлора лекарственного сырья, растений, вопросами микробиологической чистоты и стерильности препаратов, использованием микроорганизмов в производстве многих лекарственных препаратов. Систематика, номенклатура микроорганизма, принципы классификации микроорганизмов Задачи систематики показать степень родства между организмами и эволюционную связь. Принципы классификации изучает - таксономия (от греч. Taxis-расположение, homos - закон) Основные таксономические единицы в систематики микроорганизмов следующие: Ø Царство в основе тип клеточной организации (прокариоты, эукариоты, вирусы) Ø Отдел - бактерии Ø Класс Ø Порядок Ø Семейство Ø Род Ø Вид Основная таксономическая единица в микробиологии вид, род, семейство. Вид - бактерии это совокупность микроорганизмов одного генотипа, которые в одинаковых условиях имеют одинаковые фенотипические признаки. Например: Salmonella typhi (род, вид). В пределах одного вида отдельные признаки. Отдельные свойства могут варьировать, поэтому внутри вида могут вида могут определятся под виды (морфологические варианты, биоварианты, хемоварианты, фаговары, серовары(отличаются по антигенным свойствам)). Установление принадлежности к роду и виду называется идентификацией бактерий. Для идентификации необходимо изучить все свойства микроорганизмов, обнаружить эти свойства в мире микроба. Идентификация микроорганизма происходит по набору следующих свойств: тинкториальный, кульруральных, биохимических, факторов патогенности, антигенных свойств и отношение к фагам. Для облегчения идентификации предложены специальные идентификационные ключи для определенных групп микроорганизмов это наборы признаков для микроорганизма - семейства, рода и вида. Идентификации подвергаются исключительно чистые культуры организма. ЧКМ - микробы одного вида выращенные в лабораторных условиях на искусственных питательных средах. Штамм - чистая культура выделенная из конкретного источника, либо чистая культура выделенная из одного источника, но в разное время. Клон - чистая культура микробов полученная из одной бактериальной клетки Популяция микробов - совокупность особей одного вида длительно существующих на определенной территории и изолированных от других особой того же вида, популяция единица эволюции. Например популяция сальмонеллы тифи северных регионов отличается от обитающих в южных регионов. Генетическая таксономия Идентификация бактерий на основании генетического родства. В основе определение генетических структур клетки - ДНК, внехромосомных структур - плазмиды, транспазоны. Доказано что состав основавний ДНК витоспецифичны т.е. Определяется процентное содержание ГЦ от общего содержание всех оснований это может иметь значении е для определение вида. Определяется сходство или комплементарность кислот между различными организмами методом гибридизации. Устанавливают гомологию последовательности нуклеиновых кислот. Этим методом определяют родство между микроорганизмами.% сходства одного порядка равен 80%, для семейства 90%, рода 95% для вида почти 100%. Первый труд в котором были описаны и классифицированы бактерий был составлен Берджи в 1923 г. В нем бактерии разделены на 25 группы. Патогенные всего 20 групп. В определителе бактерии разделены на Gracilicutes - тонкостенные, Firmicutes - толстостенные, Teniricutes - мягкотелые. Ультраструктура бактериальной клетки Бактериальная клетка имеет постоянные структуры - клеточная стенка, цитоплазматическая мембрана, цитоплазма, рибосомы, нуклеоид. Непостоянные - жгутики, ворсинки, капсула, включения, споры. Постоянные структуры. Клеточная стенка: Функции - защитная, формообразующая, участвует в делении, транспортная, рецепторная, определяет антигенные свойства бактерии, определяет тинкториальные свойства бактерии (диффузии краски). Нарушение синтеза клеточной стенки приводит либо к гибели бактерии, либо к образованию сферобластов, протобластов (теряют способноть к размножению) или L-формы (сохранили функцию размножения). Утрата связана с антибиотиками, влияние лизоцина. Утрата будет сопровождаться () процесса и антибиотиками не лечится. Главный элемент к.С Муреин - полимер, связываются фрагменты связываются уникальными аминокислотами (есть только у прокариот), муреин является мишенью для антибиотиков именно избирательность антибиотиков связана с муреином. КлС Г(-) тонкая, в ней выделяют ригидный слой образованный пептидогликаном (20%) и пластичный слой его толщина значительна и в нем много липополисахарида (80%), который имеет базисную часть это молекула полисахарида, липид-А (отвечает за токсичность, пирогенность), О-специфические боковые фрагменты (состоят из полисахаридов, определяют антигенные свойства). Г(+) стенка толще состоит из многослойного пептидогликана 90%, тейхоевые кислоты. Тк пронизывают клеточную стенку и связываются с ПГ за счет них определяются антигенные свойства, липополисахаридов почти нет. Белки порины пронизывают КС бактерии, но размеры разные у Г(-) больше, у Г(+) меньше. Цитоплазматическая мембрана: функция: избирательная проницаемость, осмотический барьер, участие метаболизме, энергетический обмен (в составе много ферментов - цитохромы, оксидазы, дегидрогиназы, атефазы), репликация, участие в спорообразовании, выделительная. Цитоплазма коллоидная система состоит из воды включений органелл, место где идет метаболизм. Нуклеоид замкнутая ДНК (бактериальная хромосома) имеет гаплоидный набор. Методы выявления нуклеоида: специальная микрохимическая реакция по Фельгину, обнаружение в электронный микроскоп. Функции: хранение генетической информации, определение жизнеспособности клетки. Непостоянные структуры. Капсула: по химическому составу полисахаридное в-во, слизистый слой, белки, липиды. Может быть большой (больше чем клетка), маленькой можно обнаружить. Функции: защитная (от фагоцитоза макрофагами), дополнительный фактор патагенности, защищает от действия антилел, антибиотиков, придает адгезивные свойства. Продукция капсулы исключительно в живом организме, а не Вов внешней среде, на искусственной питательной среде (обогощенной полисахаридами) небольшая часть микробов может продуцировать капсулу (пневмококки, клепсиелы, возбудитель сибирской язвы). Споры: является защитной реакцией присущей некоторым микроорганизмам, при попадании в неблагоприятные условия (внешняя среда - отсутствие воды, питательных веществ, старение культуры, неблагоприятная температура), обычно палочковидные (в зависимости от этого они делятся на бациллы, кластридии (Сп + ) и остальные бактерии). Спорообразование у прокариот является формой сохранения генетического материала клетки при неблагоприятных условиях, а не метод размножения (из одной клетки 1 спора). Обязательное условия для спорообразования необходимо присутствие кислорода. Во внешней среде могут жить десятки лет. После прорастания (4-5 часов) вегетативная форма (способная к делению, метаболизму). Разрушаются оболочки споры, образуется ростовая трубочка, синтез клеточной стенки. Процесс спорообразования:. Образование спороносной зоны в которой находится нуклеоид,. Образование проспоры при этом спорогенная зона отделяется,. Образование кортекса - оболочки споры,. Отмирание вегетативной части клетки и освобождение споры. По локализации: спора может занимать центральное положение, субтерминальное, терминальное. По величине: меньше чем диаметр палочки (бациллы), больше диаметра палочки (клостридии) Свойство споры: Устойчивость. Термо- связано с химическим составом: мало воды 5-10%, много солей кальция, есть дипиолиновая кислота, поэтому выдерживает пастеризацию, кипячение. Что бы убить спору нужна T=180-200 0, 20 мин, т=120 0 + 1,5 атм. Спорообразование присуще: Бацилле антрацид - сибирская язва Кластридии - гангрена, столбняк Возбудителям ботулизма Жгутики: органы движения. Поверхностные структуры в виже ниточек, обнаруживаются только в электронный микроскоп в составе сократительный белок флагелин, прикрепляются к цитоплазматической мембране. По количеству и расположению все делятся на: монотрихии, лофотрихии (пучок), амфотрихии (два пучка), перитрихии (по периметру), Длина Ж больше чем длина клетки. Наиболее подвижны монотрихии, лофотрихии. Методы изучение подвижности: Висячая капля Раздавленная капля Темнопольная микроскопия Фазоконтрастная микросокпия Ворсинки: тонкие полые нити белковой природы, коротенькие, которые покрывают поверхность клетки, очень много, не выполняют локомоторную функции. Функции: адгезия (ворсинки 1 типа, с ними связана патогенность бактерии), конъюгативная (половые ворсинки) их мало. Включения: зерна волютина (метафосфатические обладают свойством метохромазии - способность окрашиваться не в цвет красителя), жировые зерна, гликоген. Запас питательного вещества. ОСНОВНЫЕ МОРФОЛОГИЧЕСКИЕ ФОРМЫ БАКТЕРИЙ. Ø Шаровидные Ø Палочковидные Ø Извитиые (вибрионы, спириллы (имеют лофотрихии), спирохеты) Прокариоты имеющие особую морфологию: Ø Спирохеты Ø Рикеции Ø Актиномицеты Ø Хламидии Ø Микоплазмы Спирохеты: нитевидные, спиральнозакрученые, извитые есть локомоторный внутренний аппарат представленный осевой нитью миофибрилл. Семейства спирохет. Борели - грубые завитки 2. Трепонемы - равномерные завитки. Лептоспиры имеют первичные завитки, и вторичные, утолщенные концы Дифференциация проходит: по количеству завитков, характеру концов, по характеру движения. Типы движения: Ø Винтообразные (трепонема, лептоспира) Ø Вперед-назад, право-лево Характер движения: Ø Плавные Ø Резкие Методы изучение: окраска по Романовскому-Гинзе. Борели - синие, остальные розовые. Микроскопия темнопольная микроскопия, фазово-контрастная. Риккетсии: прокариоты, маленьких размеров, Полиморфные (коковидную, кокобактериольную, палочковидные, длинную нитевидную) связано с особенностями деления, перегородка неполная и по этому клетки могут принять различную форму. Облигатные внутриклеточные паразиты на искусственных средах не растут, могут культивироваться только в живой клетке (куриного зародыша), в организме насекомых. Экологическая ниша: заселяют организм членистоногих, передаются трансмессивным путем (укусы) от насекомых - вши, блохи, клещи. Примеры: сыпной тиф. Методы выявления: окраска - Романовскому - Гинзе, по Здоровскому, при этом клетки в которых находятся риккетсии окрашиваются в один цвет, ядро в другой, сама риккетсия в третий. Микроскопия: цветовая, фазово-контрастная, электронная. Хламидии: возбудители трахомы, урогенитальный хламидиоз. Прокариоты, маленьких размеров, облигатные внутриклеточные организмы, энергетические паразиты. Морфологические формы: Ø Внеклеточная - элементарное тельце, сферическая форма, маленького размера 0,3 мкм, имеющая клеточную стенку, мембрану Ø Внутриклеточная - ретикулярное тельце, находится на разных стадиях созревания, можно обнаружить только внутри клетки, там созревает и разрывает клетку. Методы обнаружения: окраска по Романовскому - Гинзе, фазово-контрастная микроскопия, реакция имунофлюоресценции, метод иммуноферментного анализа. Микоплазмы: болезни: пневмония, бронхит, урогенитальный микоплазмоз, неонатальная патология. Особенности: Ø Нет клеточной стенки Ø Очень маленькие размеры Ø Полиморфны (сферические, нитевидные) Ø Не красятся по Граму Ø Не чувствительны к пенициллину Ø Являются мембранными паразитами - садятся на клеточную стенку и вытягивают в-ва (холестерин) Методы изучение: культивирование (с добавлением холестерина), растут медленно, РИФ, ИФА, ПЦР, фазово-контрастная микроскопия после окраски по Романовскому-Гинзе. Актиномицеты: прокариоты имеющие сходство с грибами. Полиморфные (ветвистые, короткие палочки) способны образовывать мицелий, Грам +, кислотонеустойчивые. Растут медленно. Места обитание: внешняя среда, полость рта (нормальная микрофлора). Могут размножаться спорами. Изучение: окраска - по Романовскому-Гинзе, культивирование. Морфология и структура вириона, особенности репродукции. Размеры вирионов от 15 до 400 нм. Самые крупные - оспа, герпес, маленькие - пикорна вирусы. Структура вириона: Ø Нуклеокапсид - нуклеотид (ДНК, РНК) Ø Капсид - состоит из субъединиц, которые укладываются вокруг нуклеиновой кислоты симметрично в виде спирали (палочковидная форма ), кубическая (сферическая форма). Ø Супер капсид имеет выступы в виде шипов. Химический состав: нуклеиновая кислота, белки капсида, липиды, полисахариды, ионы кальция, магния. Особенности вирусной ДНК. Типы: двунитевые, однонитевые. По форме: линейная, кольцевая, может иметь повторы на концах. В кольцевой форме способна в репликации встраиванию в клеточный геном. Вирусная РНК - является носителем генетической информации. Типы: однонитевые, двунитевые, одна нить спирально закручена, нить фрагментарная, нить кольцевая. Формы: линейная, кольцевая, фрагментированная. Функции РНК: Ø РНК+ нить - позитивный геном, способна выполнять функцию трансляции, информации на рибосомы клетки хозяина, Ø РНК-нить - негативный геном, не могут выполнять иРНК,, а являются только матрицей для образования информационной РНК. Функции вирусных белков: Ø Струткрные Ø Рецепторные Ø Антигенные Ø Ферментативные Ø Способность к самосборке Ø Услойчивость к протеолитическим ферментам клетки хозяина Репродукция вируса. Прикрепление вирона к клеточной поверхность за счет рецепторов на клетке узнающих субстанции на поверхности вируса. Высоко специыфический процесс. Например вирус гриппа способен адсорбироваться на клетках продуцирующих муцин. Клеточным рецептор выступает сиаловая кислота. Для ВИЧ-вируса СД4. При этом одни вирусы имеют клеточные рецепторы только в организме приматов. Другие вирусы только среди бактериальных клеток, третьи только в организме насекомых. Проникновение вируса в клетку. Рецепторный эндоцитоз. Вирус инвагинирует внутрь клетки с образованием фагосомы внутри клетки (Грипп). Слияние мембран - вирусная оболочка и плазматическая мембрана клетки сливается (ВИЧ), этот механизм включает и соседние клетки не инфицированные вирусом с образованием синцития.. 'Раздевание вирона'. Удаление вирусных защитных оболочек и освобождение генома. Это происходит в определенных участках при участии клеточных ферментов. Эта стадия необходима для экспрессии генома вируса, что бы все гены вируса заработали.. Переписывания генетической информации ДНК или РНК на рибосомы клетки по законам генетического кода. Транскрипция заканчивается образованием иРНК. При этом у вирусов ДНК-содержащих иРНК синтезируется на одной из нитей ДНК. Вирусы РНК-содержащие+нитевые процесс транскрипции отсутствует РНК выполняет функцию иРНК. РНК-нитевые процесс транкрипции включает образование иРНК и далее. В составе этих вирусов есть фермент РНК полимераза. Ретровирусы (ВИЧ) это РНКовые вирусы, но в составе есть специальный фермент - обратная транскриптаза транскрипция у таких вирусов включает: обратное переписывание, сначала образуется ДНК (прегеномная), затем транскрипция прямая с образованием иРНК (гомологичная геномная) и далее трансляция - белок.. Трансляция процесс перевода иРНК на специфическую последовательность аминокислот. Этот этап необходим для синтеза вирусного белка. Есть 2 способа формирования вирусных белков.. ИРНК транслируется в гигантский полипептид предшественник, который потом подвергается нарезанию на отдельные белки (полиомелит). Процесс нарезания происходит в специфических точках с помощью протеолитических ферментах. В результате образуются белки-слияния т.е. У вириона появляются инфекционные свойства.. И РНК транслируется с образованием зрелых белков. В качестве модификации может выступать-гликозилирование, метилирование, сульфирование, фосфолирирование с ним связан механизм антивирусного действия интерферона. Многие противовирусные препараты способные задержать репродукцию на ходят точку мишени в этой стадии. Репликация вирусной РНК. Синтез молекул нуклеиновой кислоты гомологичной вирусному геному. Репликация ДНК-содержащих вирусов осуществляется за счет ДНК-полимеразы. Репликация РНК-содержащих при участии фермента катализатора. И по этому у +нитевых вирусов практически не отличается от транскрипции. У - нитевых отличается только длинной образовшихся РНК. Сборка вирусных частиц. Белки, нуклеиновые. Этот процесс разобщен, протекать в разных струткурах и по времени. Вирусные Б и НК обладают способностью узнавать и самопроизвольно соединятся друг с другом. Просные вирионы собираются на мембранах ЭПС, сложные на цитоплазматическоей мембране образуя почку. Многие ДНК-вирусы собираются в ядре, на мембране где образуются нуклеокапсиды из этих структур вирусы транспортируются на поверхность клетки.. Выход вирусных частиц из клетки. Происходит за счет: 'взрыва' - при этом клетка гибнет. 'почкование' - характерен для сложных вирусов при этом клетка не погибает. Результаты взаимодействия вируса с клеткой хозяина. Продуктивная вирусная инфекция - характеризуется репродукцией вирусов. Все стадии проходят в клетке. Результат вирусная инфекция приводящие к гибели клетки (грипп, корь, ветрянка, краснуха). Интегративная вирусная инфекция. Сопровождается интеграцией нуклеиновой кислоты вируса в геном клетки хозяина и в этом виде функционирует как составная часть геном хозяина - лизогения клетки. (герпес, ВИЧ) это приводит к длительному персистированию в составе клетки. Результатом может быть злокачественная трансформация клетки. Абортивная вирусная инфекция не приводит к появлению к вирусных белков, накоплению вирусных частиц. Обычно характерен для дефектных вирусов или для вирусов, которые внедрились в покоящиеся клетки. Это способствует хронизации процесса, скрытому латентному течению и любые внешние факторы способны вызвать в выраженную инфекцию. Культивирование и индикация вирусов. Культивирования: Ø Лабораторное животные Ø Куриный эмбрион (8-10 дней) Ø Клеточные структуры ткани - монослой однородных клеток фиксированный к стеклу, который растет и размножается на специальной питательной среде (199). Они могут быть первичными - из нормальных клеток (культура Фб), она может дать только первичные регенерации в пробирке; перевиваемая - готовится как правило из опухолевой клетки (Hela), может пассироваться в течении долгих лет; Попупрививаемая - из норамльных клеток пассируется 10-15 раз. Индикация: На эмбрионе: Ø По реакции гемагглютинации (ГМА), склеивание эритроцитов под влиянием вируса. Ø Реакция имуноферментативная (ИФА) Ø РИФ На клеточной культуре: Ø По цитопатическому действию (ЦПД), которое проявляется в гибели, деструкции или образованию синтиция. Ø По выявлению специфических вирусных включений. Могут находится в цитоплазме, ядре (вирус бешенства). Ø Реакции имунофлюоресценции (РИФ) Ø Реакция гемабсорбции Ø По изменению цвета индикатора питательной среды (199) - цветная проба. Ø Метод электронной микроскопии На животных: Ø По клинической симптоматике Ø По специфическим изменением клеток Ø По включениям методом РИФ Диагностика: Вирусоскопия- обнаружение непосредственно в материале или найти его антигены, включения. Ø Электронная микроскопия Ø РИФ Ø ИФА Ø Цитоскопически Вирусологический - включает культивирование вирусов, обнаружение вируса, идентификация вируса. Ø Серологичекий - парные сыворотки больного для обнаружения специфических противовирусных антител. Генетические - обнаружить в материале больного вирусные нуклеиновые кислоты. Ø Метод гибридизации Ø Метод полимеразной цепной реакцией ПЦР 3. Физиология микроорганизмов Включает питание, дыхания, размножение бактерий. Метаболизм микрообранизмов - совокупность всех биохимических процессов происходящих в клетке. Различают энергитичекий метаболизм 9катабализм) - реакции расщепления при которых выделяется энергия; конструктивный (анабализм) - процессы синтеза веществ из которых образуются основные структуры клетки, требует энергии. Оба типа метаболизма связаны между собой, происходят одновременно, деления на два типа условно. Для питания микроорганизмов требуется 4 главных элемента: углерод, кислород, водород, азот. Эти элементы являются основой органических веществ и составляют 95% клетки. Кроме этого требуются макроэлементы: сера, фосфор, калий,, магний, кальция и микроэлементы: натрий, железо, цинк, марганец, медь. Ø Ингибиторы синтеза компонентов клеточной стенки (пенициллины, 1. Ингибиторы сборки и пространственного положения 2. Ингибиторы синтеза самого пептидогликана Пеницинины: Природные, продуцирутся грибами, использование сейчас минимально они действуют только на Г+, разрушаются НСl, неустойчивы к воздейсвию беталактамаз. Полусинтетические с 1957 года. Сейчас имеются 4 покаления. (мелин, ампициллин) Потенцированные пенициллины - в составе вещество разрушающее бета-лактамазу. Препетары действуют на Г+ и Г- (амоксиклав, сульбактан) Цефалоспорины: Природные: грибы, легко модифицируются известно более 30 препаратов. Имеется 1 поколение только на Г+, 4 покаление и на Г- Монобактаны: Карбопенемы имеют самый широкий спектр дейстия Батитроцины, ванкомицины - стрептомицетами на Г+, основной стафилококковый антибтиоттик. Циклосерин - противотуберкулезный Ø Нарушающие функцию цитоплазматической мембраны: Полимексины: бактерии, нарушают осматическое равновесие, токсичны для макроорганизма Полиеновые: нистатин-протиивогрипковый. Леварин - взаимодействуют с белком эргостеролом входящим в состав мембраны. Ø Ингибиторы синтеза белка на уровне рибосом. Влияющие на 30S - Тетрациклины - продуцируются стрептомицетами, природные сейчас не применяются. Используются полусинтетические - доксициклин, миноциклин на Г+ и Г-, микоплазмы, рикеции, хламидии. Быстро формируют дисбактериоз. Депонируются в костной ткани не назначаются детям, беременным. Аминогликозины (известно 50 препаратов стрептомицин, гентамицин,) нейротоксичны, нефротоксичны, потеря слуха. Влияющие на 50S линкомицины, Левомицитины - стрептомицетами. Г+ и Г-, анаэробы, гемофилы. Вызывают осложнение со стороны ЖКТ, нарушают функции костного мозга. Макролиды - эритромицин, троксимицин. Широкого спектра. Последние группы суммамед. Ø Ингибиторы транскрипции и синтез нуклеиновых кислот. Подавляющие синтез ДНК 2. Подавляющие синтез РНК Римфампицин - противотуберкулезный ингибирует ДНК-зависимую РНК-полимеразу. Быстро развивается устойчивость. Хинолоны - получаются только синтезом. Ингибируют ДНК-лигазу. Примеры: налидицевая кислота, оксалинеевая кислота, циноксоцин. Фторхинолоны - широкого спектра. Норфлоксацин, офлоксацин, ципрофлоксацин. Ø Препараты нарушающие метаболизм Сульфамины Триметаприн - действуют на уровне рибосом. Ингибируют синтез пуринов, пиримидинов, фолиевой кислоты. Действуют на Г+ и некоторых Г. Модификации позволяют использовать для лечения хемофильной, протейной, стрептокковой, пневмококковой инфекцией. Метранидозол - действуют против хеликобактерной инфекции. Действует на белки пиродоксины, которые участвуют в О-В реакциях. Нитрофунаны - фурациллин, фурозалидол, фурагин для лежения инфекций ЖКТ, МПС. Противовирусные антибиотики. Механизмы: Ø Ингибиторы адсорбции, проникновения, депроинезации вируса: Антитела Амантадины: ремантадин Ø Ингибиторы синтеза ранних белков вируса (еще разрабатывается) Ø Ингибиторы синтеза нуклеиновых кислот: 1. Ингибиторы фермента обратной транскриптазы: Зидафудин, ставудин, зальцитовин 2. Ингибиторы ДНК-полимеразы (протиивогерпетические): ацикловир, фамцикловир, рибовирин, доксуридин - аномальные нуклиазиды. Ингибитры синтеза нуклеиновых кислот (вирусных протеаз) саквиновир, риктоновир МЕХАНИЗМЫ РЕЗИСТЕНТНОСТИ БАКТЕРИЙ К АНТИБИОТИКАМ. Естественная резистентность, видовая связана с отсутствием мишеней. Например микоплазмы не имеют клеточной стрелки → они к бета-лактанным антибиотикам будут резистентные. Уменьшением числа мишеней 2. Приобретается в процессе жизнедеятельность. Мезанизмы: продукция клеткой специальных ферментов (бета-лактамазы, ацитилтрансферазы) инактивирующих препаратов. Изменение структуры молекулы мишени - ответственны хромосомные мутации - изменение ДНК-гиразы, РНК-полимеразы, субъединиц рибосом.. Изменение транспортных механизмов (поринов клетки) - может быть ускорение выведения препарата, снижение проницаемости клетки, хромосомные мутации. ПУТИ ПРЕОДОЛЕНИЯ РЕЗИСТЕНТРОНОСТИ. Постоянная разработка и получение новых препаратов с разными механизмами действия 2. Химическая модификация известного антибиотика.. Комплексное использование антибиотиков.. Изучение лекарственной устойчивости.. Запрещение использования антибиотиков в качестве консервантов, добавок. Ограничение применения без достаточных показаний. Иметь антибиотики резерва. Осложнения антибиотикотерапии: 1. Токсичность (нейро, нефро, гепато) 2. Развитие дизбактериоза. Формирование резистентных штаммов. Генетика бактерий 1865 год Мендель установил существование генов. 1869 Фишер выделил ДНК. Через 80 лет доказано что носителем генов является ДНК, 1953 Крик, Уотсон - расшифрована структура ДНК. Ген выполняет следующие основные функции: 1. Непрерывность наследования генетической информации благодаря механизму репликации ДНК 2. Управление структурами и функциями организма с помощью генетического кода. Благодаря мутации и генетическим рекомбинациям, которые происходят в гене осуществляется эволюция всех живых организмов. Генетический код расшифрован и характеризуется следующими свойствами: 1. Код триплетный → кодон состоит из 3 букв и кодируют одну аминокислоту 2. Код не перекрывающийся. Число бессмысленных кодонов очень маленькое (3 из 64). Последовательность расположения кодов в гене определяет последовательность положения аминокислотных остатков в полипептидной цепи. Код универсален Генетическая система обладает уникальными свойствами: 1. Способность к самоудвоению с помощью механизма саморепликации 2. Самовыражение (экспрессия) с помощью регулируемого синтеза матричной РНК. Самообновление с помощью мутаций, рекомбинаций и самоподвижных элементов. Самоисправляемая (ревизия, репарация, супрессия) Ген - структура определяющая последовательность аминокислот в ППЦ. Гены вирусов и эукариотов состоят из экзона (кодирующий) и интроны (не кодирующие). У вирусов в одном и том же фрагменте могут существовать 2 гена с разными рамками считывания. Ген не всегда строго ограниченный участок хромосомы, есть подвижные участки у бактерий. Ген требует регулирования (регуляторы, промотеры). Ген единственные носитель и хранитель жизни, а белок определяет форму и способ жизни. Эволюция генетической системы шла в направлении кодон(триплет) → ген → оперон → геном вирусов и плазмид → хромосома прокариотов → хромосома эукариотов (ядро). Объем генома у представителей различных живых организмов сильно отличается. Можно измерить в следующих единицах: молекулярная масса нуклеиновых кислот либо в количестве нуклеотидных пар либо в количестве генов. Все эти значения сопоставимы ген в среднем включает 1000 пар нуклеотидов (вируса гепатита В - 4 гена; ВИЧ - 9 генов) Генотип - вся совокупность генов у данного вида организма. 10%-70% не кодирующие гены (повторяющиеся последовательности), они не относятся к генотипу и составляют геном. Фенотип - внешние проявления генотипа в конкретных условиях внешней среды при изменении внешних условий меняется генотип, но генотип при этом сохраняется. Особенности генетики бактерий. Хромосомы бактерий располагаются свободно в цитоплазме, не ограничены мембранами, но во всех случаях ДНК бактерии связана с рецепторами на мембране. Бактерии гаплоидны, содержание ДНК не постоянно, может достигать 2, 4, 6, 8 - хромосом (у других организмов оно постоянно и удваивается только перед делением). Передача генетической информации идет не только по вертикале (материнская→дочерняя), но и по горизонтали (конъюгация, трансформация) Помимо хромосомного генома имеется не хромосомный генетический материал, который называется плазмидным геномом (эписомы, внехромосомные факторы наследственности). Это наделяет клетку дополнительными биологическими свойствами. Содержание ДНК у бактерий зависит от условий их роста или от времени клеточного цикла бактерии, которые осуществляется каждые 20-30 минут, поэтому и количество может соответствовать (4,6,8) и это сопровождается увеличением количества рибосом (этапы транскрипции, трансляции идут одновременно, возможность регулировать скорость размножения главное условие сохранения вида. Особенности репликации. Вегетативная репликация: обуславливает передачу информации по вертикали, контролируется хромосомными и плазмидными генами. Конъюгативная репликации: перенос материала по горизонтали и контролируется только плазмидными генами, при этом происходит достройка нити ДНК комплиментарной нити от донора к реципиенту. Репаративная репликация: механизм при котором устраняется из ДНК поврежденный участок Стркуктурно-функциональной едициней является оперон - группа структурных генов связанных с особым геном оператором, он управляет всей группой структурных генов и идет как самостоятельная единица, находится под контролем гена модулятора. В хромосоме гены распределяется друг за другом контролируя разные процессы, но законченный результат можно получить выбирая не последовательно (как игра на пианино). Хромосомная карта бактерий Хромосомы бактерий имеют кольцевую форму, гены располагаются линейно, их можно последовательно расположить. Локализация генов определяют в минутах их переноса, и хромосомная карта это 0-100 минут. Определение локализации гена на хромосоме называется картированием, а их расположение хромосомной картой масштаб которой в минутах. В настоящее время есть карты: кишечной палочки. Изучение организации генома бактерий. Проводится с помощью ферментов - рестриктаз способные расщепить ДНК в специфических участках, которые они комплиментарны. В настоящее время известно более 100 рестриктаз. С помощью них можно получить рестрикционные фрагменты ДНК → рестрикционный анализ. Сравнение рестрикционных фрагментов и называется рестрикционным анализом, который может быть использован для идентификации. Делают копии цепей ДНК, которые имеют липкие концы с помощью которых фрагменты вновь могут образовывать кольца. Именно за счет липких концов можно получать между разными фрагментами ДНК - рекомбинантные ДНК. Если эти фрагменты получены с помощью одной рестриктазы они могут вступать во взаимодействия между собой. Метод клонирования. Выделенный фрагмент ДНК с помощью рекомбинантных молекул вводится в самореплицирующую генетическую структуру - в плазмиду, вирус и дальше они выполняют роль вектора для клонирования. Их сшивают с фрагментом ДНК - геномом, который будет размножаться в составе плазмилы или в составе геном бактериальной клетки. Такие гибридные ДНК также можно выделить из клетки за счет рестрикции - вырезания. С помощью клонирования можно получать большое количество копий любого фрагмента ДНК, который можно метить радиоактивной меткой. Метод сегвинирования. Используют для определения последовательности расположение ДНК в клонируемом фрагменте ДНК. Методы секвинирования и клонирования это методы помогающие изучить геномы в т. Геном человека (2004). Плазмидный геном бактериальной клетки. Плазмиды - фрагменты ДНК с небольшой молекулярной массой, несут от 40 до 50 генов. Они выполняют также регуляторную и структурную функцию. Плазмиды могут располагаться либо в цитоплазме, могут иметь кольцевую структуру. Могут находится в интегрированном состоянии хромосомы (эписомы). Свойства плазмид: 1. Не обязательные генетические элементы бактерий (дополнительные). Обладают саморепликацией и автономностью, независимостью от хромосомы клетки. ДНК бактерии им не управляет.. Склонны к трансмиссии как по вертикали, так и по горизонтали обеспечивая при этом гегетическую изменчивость бактерий. Виды плазмид: F-фактор - кольцевая молекула. Ее гены кодируют образование половых ворсинок, размножение бактерий, скорость размножения с ней связывают конъюгацию, участвует в горизонтальной передаче генетического материала и передаются различные свойства: устойчивость к антибиотикам, лактозо положительность. R-фактор - детерминирует продукцию фермента β- лактамызы → устойчивость к антибиотикам. В составе этой плазмиды может быть специальный tra-оперон (ген отвечающий за перенос) → плазмида легко передается. Hly - плазмида связана с продукцией гемотоксина → более токсигенные бактерии. Col-фактор отвечает за продукцию колицинов (антибиотикоподобные вещества) обеспечивающих преимущество бактерий перед другими. Плазмиды био деградации: участвуют в расщепдлении веществ загрязняющих окружающей среды. Плазмида умеренного фага - фаг который способен распознать, внедрится, в клетку, но вызвать лизис бактерии вызвать не может. Может покидать клетку, захватывать часть генетического материала клетки и внедряясь в другую клетку участвует в переносе генетического материала (трансдукция) Плазмиды есть конъюгативные (способные к переносу, имеющие в своем составе ген переноса), неконъюгативные (не участвуют в рекомбинации). По совместимости есть несовместимые друг с другом, совместимые. Транспазоны, IS-последовательности. Относятся к дополнительным генетичесим элементам Th-маленькие участки ДНК (прыгающие) - в составе могут быть Rгены. Могут находится как в составе ДНК, так и в составе плазмид. Странспазонами связны мутации бактерии поскольку они могут перемещаться и вызывать мутации типа делеции, инверсии, дупликации. Транспазоны ограничены с двух сторон IS-последовательностями. IS-фрагменты - маленькие фрагменты ДНК, повторяющиеся, не способны к репродукции в свободном состоянии не участвуют. Основные функции: регуляторные (способны включить - выключить ген). Координируют взаимодействие транспазонов плазмид, фагов как между собой так и с хромосомой клетки хозяина. Изменчивость бактерий. Модификационная: адаптивная реакция организмов в ответ на условия внешней среды. Могут изменять морфологические, культуральные, ферментативные свойства. Генотипическая: затрагивает генотип клетки: Ø Мутационная - изменение первичной структуры ДНК, могут быть связаны с выпадением нуклеатида, делецией могут носить характер инверсии. Могут быть хромосомные, плазмидные. Могут быть спонтанные, индуцированные. Значение эволционные изменение, сопроваждается селекцией. Ø Комбинативная: трансформация - передача генетического материала в виде раствора ДНК донора к реципиенту, трансдукция - перенос генетического материала от донора к реципиенту с помощью умеренных фагов (неспецифическая, специфическая), конъюгация - передача генетического материала от донора имеющего F-фактор к реципиенту через половые ворсинки с образованием новых штаммов. Значение генетики в эволюции бактерии. Особенности генетики вирусов. Молекулярная масса геном вирусов 10 6 меньше чем масса эукариотической клетки. Организация генетического аппарата такая же. Генов от нескольких единиц до десятков.. Принцип 1 ген - молекул РНК - 1 белок у вирусных ДНК нарушен и иРНК вирусов может направлять синтез 2 и более белков. Способы увеличения генетической информации у вируса. Двукратное считывание одной и той же и РНК, но с другого кодона. Сдвиг рамки трансляции. Сплайсинг (вырез интронов). Транскрипция с перекрывающихся областей нуклеиновой кислоты → размывается границы гена и понятие ген приобретает функциональное значение. Виды изменчивости у вирусов. В основном для вирусов определяет клетка хозяина. Модификация затрагивает суперкапсид. Мутационная, то есть изменение в первичной структуре нуклеотидов. Происходит при одновременном заражении клетки хозяина двумя или более вирусами, происходит обмен генами → образуются рекомбинантные штаммы вирусов, которые содержат гены 2 и более штаммов. Генетическая реактивация. Процесс при котором вирионы дополняют друг друга в следствии перераспределения генов во время их репликации. Это наблюдается у вирусов с фрагментарным геномом. При скрещивании таких вирусов происходит образование полноценных единиц. Комплементация (дополнение). Не генетический процесс при котором вирус снабжает своего партнера (как правило дефектного) недостающими компонентами белка, а не нуклеиновыми кислотами. Характерна для многих вирусов - аденовирусы могут культивироваться только в присутсвии SV 40 - вирус. Вирус гепатита В является помощником для δ - вируса (HDV). Фенотипическое смешивание. Наблюдается при совместном культивировании двух вирусов наблюдаем, что геном одного вируса заключается в капсид другого вируса. Генотип при этом не меняется Генная инженерия. Биотехнология использование биологических объектов (клеток микроорганизмов, грибов, животных, людей) для получения полезных для человека продуктов, которые не могут быть получены другим путем. Основное направление это генная инженерия. Появилась с 1972 когда появилась первая работа по генной инженерии. Объект генной инженерии: ген или группа генов. Источники получения: вирусы, прокарилты Цель: пересадка гена в другие, гетерогенные системы, экспрессия этого гена и т.о. Получать полезные продукты (белки, фермены, гормоны, лекарственные препараты и другие БАВ) Инструмент генной инженерии: ферменты рестриктазы с помощью которых можно получать фрагменты генома. Рестриктазы имеют липкие концы для сшивания различных генов. Если их нет используют лигазы. Этапы генной инженерии: 1. Выделение гена из клетки с помощью рестриктаз из генома клетки. Присоединение гена к вектору (переносчику) - плазмиду, ДНК, РНК втрусов, умеренные фаги, искусственные плазмиды. Основные требования к вектору - должен выполнять роль саморепликации. Этот этап сопроваждается образованием рекомбинантной ДНК (ген+вектор). Введение рекомбинантной ДНК в гетерогенную систему. В качестве этой системы выступает клетка прокариотов, эукариотов, соматическая.. Экспрессия введенного гена, создаются условия что бы рекомбинантная молекула начала самореплицироваться и заставила клетку продуцировать вещество, которое кодирует перенесенный ген.. Клонирование гена и выделение продукта, очитка продукта и выхода продукта С помощью генной инженерии получают инсулин, интерферон, гормон роста, тромболитики, антикоагулянты, антигены (ВИЧ, малярийного плазмодия, бледной трипанемы) используют для создания диагностических систем, вакцины (против HBV, ВИЧ, малярии). Учение об инфекции Инфекция (от лат заражение) - совокупность физиологических и патологических реакций, которые возникают и развиваются в макроорганизме при попадании в него патогенных микробов. Участники процесса: чувствительный макроорганизм, патогенный микроорганизм, внешняя среда (социальные факторы). Особенности инфекционного процесса: 1. Всегда есть возбудитель 2. Цикличность течения. Ответная иммунологическая реакция макроорганизма на поступление возбудителя (образование антител, образование Т-лимфоцитов).. Условия развития инфекционного процесса: 1. Попадания в макроорганизм возбудителя в достаточной дозе (инфицирующей дозе) для холеры 10 9 клеток V. Cholero эта доза содержится в 1 г фекалий. Для дизентерии 10 2, брюшного тифа 10 5. Организм должен быть чувствителен. Инкубационный период будет определятся от дозы и скорости размножения. Входные ворота - место через которое возбудитель попадает в организм. Для многих возбудителей входные вороты определяют тропизм. Для гонококков - слизистая урогенитального тракта. Для гриппа - верхние дыхательные пути он миксотропен (взаимодействует с клетками которые продуцируют муцин). Для гепативо В,С - непосредственно в кровь. Для дизентерии, холеры, брюшного тифа - ротовая полость, слизистая ЖКТ. Формы инфекционного процесса. В зависимости от происхождения: Экзогенная - попадает из вне (вода, воздух, пища). Эндогенная - вызывается представителями нормальной микрофлоры, условно-патагенной. Могут вызывать заболевание при снижении защитных сил организма. Аутоинфекция - разновидность эндогенной инфекции, которая возникает в следствии смозаражения т.е. Переноса возбудителя из одного места (носа, зева) в другое (рана на руке). По локализации: Очаговая (местная) - находится в определнном месте и возбудитель находится в определенном веществе (карбункул, фурункул, ангина) Генерализованная инфекция - инфекция при котором возбудитель из первичного очага попадает лимфогенным или гематогенным путем и распространяется по всем органам и тканям. Разновидности: Ø Сактериоэмия (попадание в кровь), разносится по организму, но в крови не размножается, только в очаге. Ø Септицэмия попадание в крови и размножение в крови. Ø Септикопиэмия при ней возбудитель находится в крови, размножается в крови и попадает в органы создает там пиэмические очаги (печень, селезенка, легкие). В зависимости от свойств главных участников Абортивная - возбудитель попадает в организм, но не размножается там из за наличия хорошего иммунитета. Возбудитель в организме либо погибает либо выделяется. Клиника не наблюдается. Латентная инфекция - возбудитель попадает, размножается, клиники нет (сифилис, ВИЧ, туберкулез). Типичная инфекция - сопровождается наличием клинических симптомов болезни. Например: корь - высокая температура, сыпь. Атипичная форма - отсутствие или неярковыраженность симптомов, нет типичных симптомов. Например корь: сипи нет. Персистентная (хроническая) - характерна для многих заболеваний, длительность более 3 месяцев, характеризуется размножением возбудителя в организме, образованием антител невысокого титра, неяркой клинической картиной, отсутствием симптомов, характерна для определенных возбудителей (гепатит В, сифилис, стрептококковая инфекция может иметь и острую и хроническую инфекцию благодаря переходу в L-форму). Медленная инфекция - выделена в самостоятельную группу недавно. Примеры - ВИЧ (и.п несколько недель, клиники нет несколько лет), прионовые болезни, лепра (проказа) - инкубационный период может несколько лет. Бактерионосительство - такая форма инфекционного процесса при котором нет клинических проявлений, но возбудитель находится, размножается, выделяется из организма с патологическим материалом и человек становится источником заражения для своего окружения. Может развиться после перенесенного заболевания. По количеству возбудителей: Моноинфекция - одним возбудителем Миксинфекции - двумя или несколькими возбудителями Вторичная инфекция - процеес при котором к уже инфекции присоединяется еще один возбудитель. Например первая инфекция грипп, а к нему присоединяются стафилококки, стрептококки. Реинфекция - повторное заражение тем же возбудителем, после перенесенной инфекции при которой иммунитет не сформировался. Например: гонорея, сифилис, ВИЧ. Суперинфекция - повторное заражение тем же самым возбудителем в острый период болезни, когда иммунная система еще не отреагировала. Протекает тяжело. Может наблюдаться и при одновременном попадании большой дозы одного возбудителя при первичном поступлении (дизентерия, гонококк) Рецидив - такая форма процесса для которой характерен возврат клинических проявлений болезни без повторного заражения. Рецидив связан с активацией возбудителя (брюшной тиф, малярия) Периоды инфекционного процесса. Инкубационный - период который начинается от момента поступления микроорганизма в организм. В зависимости от биосвойств возбудителя разный. Дизентерия 1-3 дня, грипп от нескольких часов до суток. В этот период происходит адаптация и размножение возбудителя. Пациент не заразен (исключение: гепатит А, В, ВИЧ, сифилис, полимеилит). В сыворотке больного антител нет, иммунная система еще не отреагировала. Продромальный - период предвестников. Занимает по времени от нескольких часов до нескольких дней. Период первых клинических проявлений болезни - температура, головная боль, бессонница, озноб, но типичных симптомов в этот период еще нет. Возбудитель массивно выделяется в окружающую среду. Пациент максимально заразен.. Разгар болезни - выраженные клинические специфические признаки болезни (корь - высыпание, ветрянка - пузырьки). Возбудитель накопился и идет ответная реакция организма, есть антитела. Возбудитель массивно выделяется в окружающую среду. Пациент максимально заразен.. Период реконвалесценции - характеризуется снижением клинических проявления, заканчивается иммунологическая реакция, титр антител максимален. Возбудитель выделяется из организма. Происходит санация (освобождение организма от возбудителя). Классификация микроорганизмов по способности вызывать инфекционный процесс. Патогенность - способность микробов вызвать инфекционные процесс. Для проявления возбудитель должен попасть в чувствительный организм (человек - антропонозы, животное - зоонозный, животных и человека - антропозоонозы) т.о. Это качественный, генотипический признак многих микроорганизмов. Условнопатагенные Сапрофитические Факторы патогенности: I. Фактор токсиногенности могут продуцировать экзотоксины и эндотоксины. Микробные антигены Сосредоточены в клеточной стенке: белки определяют группу О-соматически антигенов (термостабилен) может иметь липополисахаридную природу, поверхносные белки группу К-антигенов, типоспецифичные. Жгутики - Н-антигены это белок флагелин (термолябилен). Экзотоксины так же антигены, эксоферменты (плазмокоагулаза). Coli О 111, К 56 (род, вид, тип (111,56) - серовар, типоспецифический антиген). Typhy О 9 (т.е. Относится к группе Д). Есть общие антигены внутри семейства, но всегда есть видовые и сероварные антигены изучая антигенную структуру можно идентифицировать бактерии. Гетероантигены: общие антигены между бактериями и другими биологическими объектами например: человек - сифилитическая трепонема. Второе их название перекреснореагирующие антигены (ПРА) способны реагировать с антителами поэтому антитела на трепонему могут реагировать с тканями и запускать аутоиммунный процесс. Антигены вирусов. Нуклеиновая кислота вместе с капсидными белками у простых вирусов. У сложных вирусов есть еще суперкапсид и на поверхности этой оболочки есть липротеиновые антигены (обозначаются цифрами). Например у гриппа: имеет нейроамидазный антиген (около 5), Н 1, Н 5 (птичий грипп). С помощью них вирус адсорбируется на поверхности эритроцитов и склеивает их, нейроамидазный адсорбируется на мембранах клеткок. По антигенным свойствам можно идентифицировать вирусы. Антигены тела человека. Изоантигены (индивидуальные антигены). Представлены на различных органах. Эритроцитарная система (АВО, Rh) - по ним делят на группы крови и резусы. Их более 70, но практически используются только АВО и резус. В большей степени изоантигены изучены на лейкоцитах т. О образуется система гистсовместимости по индивидуальным тканевым антигенам (Мaior Нistocompa Tibiliti Сomplex) или НLA. Совместимость по этой системе проводится в случае пересадки органов и костного мозга, Эти антигене генетически детерминированы, сцепеленны с генами иммунного ответа. МНТС разделены на 3 класса: 1. Предствалены на поверхности всех ядер клеток нашего организма 2. Представлены на поверхности имунокомпетентнык клеток. Представлены на белках системы комплемента Функции: класс позволяет разделять свое от чужого, 2 класс участвует в двойном распознавании антигена, могут усилить иммунные ответ, заставить клетку дифференцироваться. Врачи еще различают опухолеспецифические антигены, эмбриональные антигены, маркерные опухолевые, трансплантационные антигены (сингенные - собственные, однояйцевых близнецов, чистых линий животных, аллогенные - взяты от другого человека, другой линии животных, ксеногенные - взятые от другого биологического вида(например человеку лимфоциты свиней)). Имуноглобудины, γ- глобулины - синонимы антител. Антитела - специфические белки синтезируемые в организме в ответ на поступление антигена находятся в сыворотке крови и находятся в γ- глобулиной фракции сыворотки крови. Составляют основу гуморального иммунитета. Приблизительно в сыворотки крови человека γ- глобулиновая фракция составляет 20%. Строение антител: молекула Ig- состоит из двух идентичных, тяжелых цепей Н и 2-х легких L цепей которые соединяются между собой дисульфидными мостиками. Структурной единицей Ig являетмся мономер состоящий из 2 Н и 2 L цепей. Среди него различают вариабельную часть и константную часть. Вариабельная часть Н и L цепей составляют фаг-фрагмент к которому присоединяется антиген (2 штуки) специфичность этой связи носит название аффиности антитела, скорость и прочность связи определяет авидность. Константный фрагмен - отвечает за неспецифические функции антител: связь с комплементом, связь с фагоцитами, тучными клетками. В зависимости от структуры строение, формы Н-цепей различают 5 классов Ig: 1. IgD Таблица IgMIgGIgAIgEIgDМолекулярная масса900160160-400Количество мономеров512Валентность1024Прохождение ч/плаценту-+±Константа седиментации19S7SФункцииУчаствуют в агглютинации, преципитации, активации, опсанизации, антибактериальная активность, нейтрализуют токсиныТо же - бывают 2 варианта: сывороточные и секреторные, продуцируются клетками эпителия кишечника. Секторные это диметры есть компонент который защищает его от секретов пищеварительного сока, слюны, они обеспечивают местный иммунитет слизистых оболочек. IgE - свидетели аллергических реакций, в сыворотке крови появляются при аллергических реакциях немедленного типа, взаимодействуют с тучными клетками и заставляют продуцировать гистамин, что определяет аллергии немедленного типа (крапивница, анафилаксия). IgD - мономеры, склонны к агрегации, продуцируются зрелыми В-лимфоцитами к 10 годам появляются при аутоиммунной патологии, беременности. Свойства антител. Нормальные антитела - естественные антитела которые присутствуют в любой сыворотке человека, животного и дают базальный уровень иммуноглобулинов: антиэритроцитарные антитела, противобактериальные. Эти антитела постоянны в организме, дополнительной антигенной стимуляции не требуется все перечисленные микроорганизмы постоянно контактируются с человеком. Моноклональные антитела - это антитела к одной антигенной детерминанте они принадлежат к одному классу, подклассу аллотипу имеют один вид легких цепей, имеют одинаковую аффиность поскольку моноклональные антитела образуются одним клоном В-лимфоцитов и поэтому эти антитела гомогенные, когда иммунизируют человека вакцинным препаратов или после болезни в сыворотке человека появляется антитела к разным антигенным детерминантам. И поэтому иммунные сыворотки от переболевших или иммунизированных гетерогенны. Гетерогенность антител снижает чувствительность методов индикации антигенов с помощью сывороток. Получают моноклональные тела методом in vivo гибридом разработанным в 1975 году Келлером и Мильштейном (Нобелевская премия). Суть получение антител этим методом состоит в следующем: 1. Этап: Получение гибридому и отбор клеток. Мышь иммунизируют антигеном, после иммунизации берут селезенку и получают из нее лимфоциты, которые должны превращаться в плазматическую клетку продуцирующие антитела. Другую мышь (Balb C) с плазмоцитомой (опухолевый процесс поражающий селезенку) в органах этой мыши есть опухолевая плазматическая клетка, которую совмещают с нормальными клетками от здоровой мыши в присутствии полиэтиленгликоля, которые помогают гибридизации. Получившиеся клетки отбирают на селективной среде - ГАТ (гипоксантин - аминоптерин - тинидин) в этой среде погибнут нормальные клетки, опухолевые клетки, а гибридомные выживут и будут расти. Этап: Отбор клеток нужных продуцентов. Проводится методом тестирования на искомые антитела. Делают с помощью иммунологических реакций ИФА, РИФ, пластинки с имобилизированным антигеном. Этап: Клонирование гибридомных клеток много раз на специальной питательной среде.. Этап: Консервирование - сипользуют низкие температуры. Этап: Получение моноклональных антител. Гибридломные клетки вводят внутрибрюшинно белым мышам (здоровым) они там размножаются у них возникает асцит в котором содержится много моноклональных антител. Второй метод: размножение гибридомных антител на культуре и они там продуцируют антитела (in vitro). Моноклональные антитела получены к антигенным детерминантам Т (СД4) и В-лимфоцитов. МКА используются для идентификации Т и В - лимфоцитов и их субпопуляции, которые определяют активность, продукцию лимфокина. МКА получены для идентификации цитокинов в сыворотке, ВИЧ-вируса, для диагностики определяют антигенные детерминанты вещества. МКА используют в онкологии для терапии опухолевых заболеваний. МКА для таксономических идентификаций. В последнии годы гибридому культивируют с помощью аппарата цитостат куда подается питательная среда и гибридомность поддерживается автоматически → большое количество генетически гомогенных антител. Полные и неполные антитела: Деление основано на способности полных антител образовывать в результате иммунологической реакции с антигеном комплекс видимый невооруженным глазом (агглютинация) при преципитации этот комплекс называется преципитат (т.е. Аморфный осадок). У полного антитела имеетя две и более валентности (активных центров) и взаимодействия с антителом образует решетку. (IgM, IgG, IgA) Неполное антитело моновалентное и взаимодействуя с антителом связывает одну детерминанту и этот комплекс мы не видим поэтому они еще называются блокирующими антителами. Поэтому для выявления неполных антител требуется специальный метод Кумбса при котором используются вторичные антитела, и оно садится на первичное антитело и тогда этот антиген свяжется в макроагрегат. Комплимент связывающие несвязывающие антитела. Связывающие взаимодействуют с комплментом с помощью FС-фрагменту и дальше идет реакция связывания комплемента. Несвязывающие не взамодействуют с комплементом. Антитела абзимы - абзимология (антитела ферменты), катализаторы биохимических процессов. У мноих Ig есть ферментативная активность (протеазная, нуклеазная). Есть антитела ферменты и на другие разновидности веществ. Считают что эти свойства антител очень древние. Бифункциональные антитела: обладают две специфичности фаг-фрагментов т.е могут присоединять два антигена разной специфичности. Имунотоксины: гибрид молекулы Ig с токсином. Эти антитела получают методом биотехнологии. Присоединяя к Ig молекулу токсина такое антитело способно направленно доставить токсин к клетке мишени (опухолевой) и нарушить метаболизм этой клетки. Используют в лечении опухолей, аллергий. Антигенные свойства антител. Само антитело любой специфичности наделен антигенными свойствами и поэтому в молекуле Ig различают четыре антигенных детерминанты: видовые, изотипические, аллотипичесике и идеотипические. Видовые: характерны для Ig всех особей. Определяются строением легких и тяжелых цепей. Изотипические: являются групповыми и служат для дифференцировки иммуноглобулина на 5 классов (M, G, A, D, E) и множества подклассов G и А имеет подклассы. Локализуются детерминанты в тяжелых цепях. Аллотипические: Являются индивидуальными присущими конкретному оргназму, они располагаются в легких и тяжелых полипептидных цепях и на основании их можно различить особи одного вида. Идеотипические: располагаются в активных центрах. Обнаружение этого антитела послужило основание для создания теории антиидеотипа, которая лежит в основе регуляции биосинтеза антител. Этот антиген обладает регуляторными свойствами (когда идеотипов много→много антиидеотипа→прекращается синтез антител). Основные свойства антител можно разделить на прямые эффекты (эффеторные свойства) т.е. Способно нейтрализовать антиген, оказать ферментативное действие, IG является маркером антигена, эффекторные свойства направлены на участие или кооперативное действие антитела с фагоцитами, комплементами, с помощью этих взаимодействия и осуществляется прямое действие. Непрямое действие связано с активацией комплемента, индукцией иммунного фагоцитоза и антителозависимой клеточная цито токсичность. Генетика антител. Образованию антител присуще своеобразное гентичекое кодирование. Структура кодируется ни одним геном, а большим числом генов эти гены находятся в фрагментарном состоянии которые располагаются в трех различных хромосомах и располагаются независимо. Молекулярно-генетическая теория происхождениея разработана Тонегавой 1983 году и основа этой теории состоят в следующем: 1. Лимфогенез в нашем организме идет непрерывно 2. В пределах одного оргнаизма существует или может возникнуть В-лимфоциты специфичные практически к любому антигену. Дифференцировка В-лимфоцитов возникает в результате первичного иммунного ответа, идет непреавно с размножением и одновременно дифференцировка сопроваждается перестройками в впередалх имуноглобулиовых генов этот процесс сопровождается последовательной сменой классов иммуноглобулинов. На первом этаме образуются IgМ, а потом на позних стадиях этот же В-лимфоцит продуцирует IgG этой же специфичности. Попутно идут точечные перестройки иммуноглобулина что привдит к тому что на повенрхности иммуноглобулина появляются специфические реценторы. Результат: рекомбинация генов иммунного ответа. Динамика антитела продукции. Выделяют латентную фазу: переработка антигена и представление его имунокомпетентной клетке→ пролиферация специфического клона клеток антител. Титры антител не появляются (3-5 дней). Логарифмическая фаза: увеличение В-лимфоцитов которые пролиферируют и распространяют антитела (титр растет, 7 - 9 день). Стационарная фаза максимальный уровень антител в крови 20-30 день Первичный иммунные ответ. Снижение антител 2-4 месяц, образование иммунного ответа, образование IgM, D. В конце может быть в сыворотке Ig G, A т к наступает переключение синтеза в следствии образуются клоны В-лимфоцитов специфичные для конкретного антигена и образуются В-лимфоцита памяти. Повторный контакт приведет к образованию вторичного иммунного ответа. Вторичный иммунный ответ: коротка латентная фаза равна я1-2 дням, высокий титр антител только IgG. В-лимфоцитов память будет больше. Это используется в практике: вакцинация которая включает первичную вакцинацию и обязательную ревакцинацию. Получение иммунных сывороток. Иммунологическая память - способность организма при повторной встрече с антигеном реагировать более активно (вторичный иммунный ответ), сохраняется годами за счет образование В-лимфоцита. ИП характрна как и для гуморального так и для клеточного иммунитета. Эти используется в вакцинации. Иммунологическая толерантность (ареактивность) - форма иммунного ответа противоположная имуногогической памяти, отсутствие иммунного ответа на повторную встречу с антигеном. Бывает врожденной (отсутствие иммунной реакции на собственные антигены), приобретенной (после введения препаратов имунодепресантов снижающих иммунный ответ или введение в эмбриональном периоде, когда иммунная система еще не функционирует. ИТ была открыта в 1953 году Медаваром и Гашеком (Нобелевская премия). Механизм не расшифрован, нос считают связан с: 1. Элиминацией клонов лимфоидных клеток реагирующих на антиген. Разрушение клона идет за счет апоптоза. Блокада рецепторов В и Т клеток 3. Быстрое связывание антигена и выведение его из организма. Антиген который вызывает ИТ - толероген это чаще всего полисахарид, способны сохранятся. Явление ИТ используется для решения таких проблем как пересадка органов и тканей за счет облучение организма, приема имунодепресантов, для лечения аутоиммунных реакций, аллергической патологии и других состояний.. Имунопаталогия 1. Аллергические реакции 2. Аутоиммунные процесс. Иммунодефициты Аллергические реакции. Термин Аллергия был введен в 1906 году Пирке для обозначение состояний повышенной реактивности у детей, которую он наблюдал иногда при некоторых инфекционных процессв. Allos-другой, Ergos - действуя. А одна из форм иммунного ответа при которой формируется повышенная чувствительность к антигенам аллергенам. Первая доза аллергена называется сенсибилизирующей. Вторая доза - разрешающей именно при ней возникает неадекватна реакция иммунной системы. Аллергия как и все формы иммунного ответа характеризуется скрытым периодом, высокой специфичностью на определенные аллергены, а так же появление м накоплением в организме антител или Т-лимфоцитов. Механизмы можно разделить на до имунные механизма и эффекторные механизмы. Эффекторные механизмы не имеют защитного значения они патофизиологической аллергию рассматривают как форму патологии. Аллергены - антигены способные вызвать аллергические реакции. Любой антиген может быть аллергеном. Аллергены физическими и химическими свойствами могут отличать от антигенов: меньше молекулярная масса, хорошо диффундируют через неповрежденные кожные и слизистые. Хорош растворимы, легко проникают в жидкости организма, химически стабильны. Проявляют действие в маленьких дозах. Легко вступают в химические связи с белками организма. Чаще всего аллергенами бывают гаптены, полугаптены, которые приобретают антигенные свойства при взаимодействии с белками. Экзогенны бытовые, эпидермальные, пыльцевые антигены, химические, косметические, пищевые аллергены, микробные антигены, вакцины. Эндогенные аллергены: собственные ткани организма (ткани забарьерных органов) выступает как аутоаллерген - мозг, щитовидная железа, яичко, ткани измененные в результате патологических болезней, собственна микрофлора организма. Общий механизм аллергических реакций. Сводится к стадиям: 1. Иммунологическая - происходит встреча аллергена с клетками и мунной системы и в ответ на первую встречу вырабатываются либо антитела (А, Е, G) либо Т-хелперы 1 2. Патохимическая - развивается на вторую дозу (разрешающую) сопроваждается выделением биологически активных веществ - цитокинов.. Патофихзиологическая - происходит взаимодействия антигена с антителами или Т-хелперами 1 это взаимолдействие сопроваждается нарушением различных функций орагнов и тканей. В 1930 году Р. Кук разделил аллергии на 2 типа: гиперчуствительность немедленного типа, гиперчуствительность замедленного типа. Первая развивтаеся через 30 минут после повторного введение антигена, вторая спусть 48-72 часа. Год Джелл и Кумбс в зависимости от патофизиологической фазы патофизиологической реакции классифицировали на 4 типа: Первые три носят гуморальный характер, связан с антителами, возможен пассивный перенос с сывороткой Четвертый связан с образованием Т-хелперов 1 носит клеточный характер пассивный перенос с сывороткой невозможен.. Реагиновый (анафилактический) - при первичном контакте с антигеном (в растворимой форме) образуются IgE (реагины) особенностью этих иммуноглобулинов является тропность к тучным клеткам, своим ФЦ фрагментом способны адсорбироваться на рецепторах тучных клеток. Такие же рецепторы есть и на базофилах и в таком виде эти антитела на тучных клетках сидят до тех пор пока не поступит антиген второй раз. Повторное введение антигена вызывает образование комплекса антиген-антигело сидящее на тучной клетке это сопровождается активацией тучных клеток и базофилов и активация тучных клеток сопровождается выбросом из тучных клеток вазоактивных веществ - гепарин, гистамин, лейкотриены, простогландины, ферменты (триптаза, химаза, катепсин), цитокины. Все эти вещества обеспечивают клинические проявления реагиновой реакции - спазмы гладкой мускулатуры бронхов, ЖКТ, ослабление сердечной деятельности, колляптоидное состояние, вызывают отек, повышение сосудистой проницаемости, зуд и др. Примеры: реакции анафилаксии (шок), крапивница, отек Квинке (отек гортани, подкожной ткани, одышка), поллиноз (сенная лихорадка - аллергия к пыльце) - риниты, конъюнктивиты, бронхоспазмы; бронхиальная астма - воспаление, бронхоспазм, усиление секреции слизи в бронхах; пищевая - тошнота, диарея, сыпь, зуд. Все это входит в группу атопических болезней. Атопия - наследственная предрасположенность к развитию гиперчувствительности немедленного типа обусловленная повышенной выработкой IgE, повышенной проницаемостью тканевых барьеров. Лабораторная диагностика: определение в крови больного иммуноглобулина класса Е, общих иммуноглобулинов и IgЕ специфических, определение уровня гистамина, триптазы, интерлейкинов. У больных поллинозом в мазках из носа определяют количество эозинофилов от 10 до 100% в норме 2%. Эозинофилия в крови. Кожные тесты - внутрикожное введение антигена и учет реакции через 15-20 минут (положительная реакция появление волдыря). Цитотоксический - развивается в ответ на повторное поступление как эндогенных аллергенов (аутоантигены) и на экзогенные аллергены (лекарственные препараты, химические косметические вещества, гаптены). Особенностью аллергенов является способность прикрепляться к мембранам клеток. В основе этой аллергии антитела класса G и комплемент, макрофаги, нормальные клетки киллеры. Время развитие реакции минуты, часы. Разновидности: цитолиз клетки к которой прикрепился антиген, котрые вызывает антитела с комплиментом; иммунный фагоцитоз клетки на которой сидит аллерген с антителом; антителозависимая клеточная цитотоксичность здесь участвуют клетки киллеры вместе с антителами и тогда нормальные клетки киллеры начинают продуцировать перфорины, кранзимы которые способны нарушить проницаемость клеточной мембраны и способны вызвать гибель клетки. Клинические проявления: соответствуют некоторым аутоиммунным болезням - злокачественная миостения (аутоантиген ацетилхолин)- мышечная слабость, образуются аутоантитела против рецептора ацетилхолина и они адсорбируют на клетках мышц → мышечная слабость, аутоиммунная гемолитическая анемия, аутоиммунный гипертиреоидизм, лекарственная анемия, тромбоцитопения. Лабораторная диагностика: определение противотканевых антител методом ИФА. Определение с помощью РИФ наличие антител и комплементов поврежденных участков.. Имунокомплексный - основан на образовании в организме пациента иммунологического комплекса антиге-антитело, который соединяется с комплементом и циркулируют в крови и имеет склонность откладываться, фиксироваться на базальных мембран эндотелия кровеносных сосудов. В качестве антитела выступают IgG, IgM, базальные мембраны сосудов имеют рецепторы для ФЦ фрагмента иммуноглобулина и поэтому это комплексы способны прикрепляется к эндотелию сосудов, что позволяет прикрепится к стенке, агрегировать тромбоциты, активно фагоцитировать. По этому типу развиваются следующие патологии: сывороточная болезнь - развивается при введении сывороточных препаратов содержащих антитела (в качестве антигенов белки сыворотки) например лошадиные антитоксические сыворотки или при введении нормальной плазмы крови при большой кровопотери т.е. Белковые препараты. Во всех случаях на первое введение образуются антитела IgG, которые при повторном поступлении белка связываются с этим белком и образуется комплекс антиген антитело к которому присоединяется антиген и дальше этот комплекс начинает циркулировать в крови и откладываться на базальных мембранах кровеносных сосудов развиваются васкулиты, нефриты, гиперемии, зуд. Сывороточная болезнь начинается на второй неделе после введение препаратов, системная красная волчанка, нефрит. В качестве аллергена выступают бактерии. Вирусы, паразиты, грибы или эндогенные аллергены. Лабораторная диагностика: обнаружение циркулирующих иммунных комплексов, определение биоптатов тканей для выявление отложений с помощью РИФ. Клеточно-опосредованный - проявляется после проникновения антигена в разрешающей дозе через 48-72 часа, специфические антитела в сыворотке отсутствуют на антиген, состояние нельзя передать пассивно с сывороткой. В основе ГЗТ Т-хелпер 1 и макрофаги, десенсибилизация невозможна. ГЗТ лежит в основе многих инфекционных заболеваний (туберкулез, сифилис, бруцеллез, туляремия, сальмонеллез, борелиозы, микозы, паразитозы, герпес) аллергеном выступают сами микроорганизмы. Аллергия такого типа лежит в основе реакции отторжения трансплантанта, противоопухолевого иммунитета, в ответ на вакцинацию некоторых живых вакцин (БЦЖ, туляремийную вакцину) на введение лекарственных препаратов, косметических препаратов, которые при попадании в организм соединяются с белками ткани образуя полноценный антиген на который развивается ГЗТ. Различают три формы ГЗТ: 1. Контактная - 48-72 часа, отвечают за нее Т-лимфоциты воспаления, макрофаги. Клинические проявления экзема, отек. Аллерген может быть: химические вещества, косметические вещества, лекарственные препараты. Туберкулиновая - в качестве аллергена туберкулин (полученный из микобактерий туберкулина), развивается на введения бруцелина, тулерина развитие 48-72 часа отвечают за нее Т-хелмеры 1, макрофаги. Клинически проявления: местные проявления. Выявить можно с помощью реакции манту (обнаруживая папулу).. Гранулематозная: развивается в течении 3-4 недель. Отвечают за нее макрофаги, эпителиоидные клетки соединительной ткани, гигантские клетки, Т-хелперы 1 (на первой неделе). Клинические проявление - образование гранулемы (уплотнения). Во все случаях ГЗТ носит защитный характер и направлена на отграничение возбудителя от проникновения и распространения в другие ткани и органы. В воспалительном инфильтрате будут активно работать макрофаги и Т-хелперы воспаления, которые будут продуцировать интерлейкины, цитокины, γ- интерферон, фактор МИФ, должны работать макрофаги. Лабораторная диагностика: внутрикожная проба с аллергеном - туберкулин 0,1 мл в котором 5 туберкулиновых единиц внутрикожно ч/з 72 часа определяют диаметр папулы (более 5 мм реакция +), тулярин, флюитин, антроксин. Эти пробы диагностическе т.к. Позваляют выявить инфекционную аллергию сопровождающую заболевание; гистологическое изучение. И- морфологическая и функциональная недостаточность органов (маленький вес, недоразвие) и клеток иммунной системы (мало клеток, несбалансированность). Имунодифициты делят на врожденные (наследственные этиология - дефект генов иммунного ответа). Различают дефекты Т и В звена иммунитета и комбинированные дефекты. Частота 1 на 10 000-100 000 новорожденных. Дефицит по иммуноглобулину А 1 на 500-1000. Главный первичный симптом состоит в частоте инфекционных заболеванию у таких детей. Подозрение возникают у врача когда ребенок болеет более 10 раз за год. У детей с ПИД инфекционное залевание может иметь персистирующий характер. При обследовании таких детей определяется уменьшение лимфатических узлов, отсутствуют миндалины, чаще регистрируют отиты, диареи, кандидозы, синуситы. Классификация ПИД: 1. Дефицит антител - агаммаглобилемия Брутона при данном забелвани нет В-лимфоциов, в сыворотке нет IgM, A нет G мало, Т-лимфоцитов норма. На вакцинные препараты антител нет. Синдромы с дефицитом Т-клеткок. Носит фатальных характер, детей нельзя иммунизировать живыми вакцинами, клиническая картина - на живые вакцины развернутая клиническая картина заболевания. Заболевания модет возникнуть из за нарушение гена → дефект аденазиндезаминазы.. Синдром голых лимфоцитов - на мембране лимфоцитов не будут образовываться рецепторы. У таких пациентов отсутсвуют СД 8 - 4, нет рецепторов для комплекса гистосовместимости, такеи лимфоциты не способны для кооперативного изменения в ответе.. Синдром Ди Джорджи - комбинированный порок развития тимуса - гипоплазия, аплазия. Клинические проявления - инфекции, гипокальцемия, тетания, кардиоваскулярные пороки.. Атоксия телеангиоэктазия - появляется на коже, слизистых телеангиоэктазы (сосудистые звездочки) снижел уровень иммуноглобулинов (А,Е,G). Связано состояние с мутацией в гене АТМ, сопровождается развитием новообразований. Иммунодефицит с дефектами фагоцитов - хроническая гранулематозная болзнь. Фагоциты могут окружать патоген, но переварит его не могут/вторичные (приобретионные) -СПИД, ожеговая болзнь, психическеи заболевнаия, химические вещества, радиация, плохая экод=логия. Человек может с ними жить. ЧАСТНАЯ МИКРОБИОЛОГИЯ. Возбудители гнойно-воспалительных болезней. Стафилококки, стрептококки, энтеробактерии, песевдоманады, анаэробы: бактероиды, грибы. Большинство возбудителей гойно-воспалительных заболеваний входят в группу условно-патагенных микроорганизмов. Широко распространены среди людей обитают на коже, слизистых входят в состав нормальной микрофлоры. Условия развития гнойно-воспалительных болезней: 1. Снижение резистентности организма 2. Период новорожденности. Попадание большой дозы возбудителя. Попадание условно-патагенных микроорганизмов в необычный эфитоп (при операции, при медицинском обследовании и др.) Распространению внутрибольничных инфекций (ВБИ) большая роль отводится гнойно-воспалительным инфекциям. Способствует нарушение санитарного режима. Нарушение правил асептики, антисептики. Неэффективная дезинфекция, не эффективная стерилизация. Госпитальная инфекция - группа гнойно-воспалительных заболеваний, которая развивается спустя 48 часков от момента поступления пациента в стационар или получения медицинской процедуры. ГИ регистрируется и среди медицинского персонала. Особенности диагностики ВБИ: 1. Разнообразный материал из которого можно выделить возбудители (гной, кровь, моча, мокрота, слизь) 2. Бактериологическое исследование - посев с подсчетом микроорганизмов т.к. Возбудители входят в состав нормальной микрофлоры. Определение нарастания титра антител в сыворотке больного. Это в основном смешанные инфекции. Носят гнойно-воспалительный характер. Возбудители хорошо сохраняются в окружающей среде, на предметах обихода, в лекарствах → являются санитарно-показательными микроорганизмами для оценки микробиологической частоты. Входят в 2 больших семейства: микрокакации, стрептокакации. В семействе микрокакации, род стафилаккокос, стоматококкус, микрококус. Семейство стептококации рода стрептококус. Микрококки отличаются от срептококов отличаются прежде всего расположение кокков в препарате: микро-без порядочно, степто-в цепочке. Микрококки - каталаза +, стептококки - каталаза - Род Stahhylococcus. Количество видов внутри стафилококков 27 и более, самыми главными являются aureus (патогенный), epidermiyis, saprophyticus (условнопатогенные), gominis, capiticus. Из 27 - 14 обнаружены на коже и слизистых человека. Общая характеристика стафилококков: широко распространенные организмы, выделяются при гнойных поражениях, изучены Пастером. Небольших размеров, располагаются в мазках, при посеве гроздевидные, неподвижны спор нет, факультативные анаэробы. Культуруальные свойства: легко культивируютна на простых средах, для их дифференциации используются элективные питательные среды (с высоким содержанием NaCl) - ЖСА, продукция пигментов - белый, желтый, золотистый. На жидких средах диффузный рост, оптимальная температура роста 30-37 градусов. Биохимические свойства: ферментирую сахара до кислоты без газа, индол не образуют, уреазу - образуют желатин разжижают. Факторы патогенности: 1. Токсинообразование Ø Гемотоксины, Ø Термотоксины, Ø Лейкоцидины Ø Экзотоксины вызывающие синдром токсического шока 2. Образование ферментов Ø Коогулазы у золотистого, у остальных нет Ø ДНК-аза Ø Лецитиназа Ø Протеиназа 3. Факторы адгезии -связывают иммуноглобулина за счет Fc-фрагмента 4. Антифагоцитарные факторы Ø Протеин клеточной стенки Ø Пептидогликан Ø Микрокапсула 5. Факторы инвазии: проникают внутрь эпителиоцитов, макровфагов и размножаются там. Клетка погибает, наступает ее апоптоз. Факторы инвазии кодируются генами плазмид. Факторы эндо- и экзотоксиноза: Экзотоксины продуцируют только палочка Шига, остальные эндотоксины. Палочка Шига вызывает тяжелую дизентерию с кровавым поносом. Экзотокисн сходен с гемотоксином эшерихий, сальмонелл. Ген отвечающий за токсинообразованиее входит в состав умеренного фага → передается из клетки в клетку. Эндотоксины - липополисахаридные комплексы оказывающие пирогенное действие, общетоксическое действие. Эндотокссинообразование кодируется плазмидными генами. В зависимости от эндотоксинообразования шигеллы зоне дают колонию двух типов 1 (с геном) и 2 (без гена). Возбудители дизентерии. Основные возбудители в настоящее время Sh. Flexneri и Sh. Sonnei, остальные встречаются редко. Особенности патогенеза: источник больной человек (особенно опасены легкие формы), бактерионоситель. Пути передачи: водный, пищевой, контактно бытовой Входные ворота: рот Инкубационный период: от 1 до 5 дней это необходимо что бы прошел слой слизи, гликокаликса и адсорбироваться на слизистой оболочке дистального отдела кишечника ( особенно в сигмовидной и прямой кишке) там идет стадия адгезии и колонизации → проникновение эпителиоцитов → размножение. Клинические симптомы: воспаление, эрозии, язвы на слизистых оболочках кишки. Болезненные, спастические сокращения кишечника, болезненные позывы на стул (тенезмы), стул маленького объема (ректальный плевок), много слизи и прожилки крови. Явления общей интоксикации. Иммунитет: не стойкий, не продолжительный, не напряженный, типо- и видоспецифический. Защитное значение имеет местный иммунитет связанный с образованием в кишечнике IgA - копроантитела. Гуморальный характер иммунитета большого защитного значения не имеют. Лабораторная диагностика: только бактериологический. Материал: фекалии, слизь из прямой кишки в количестве 1 г. Посев делают быстро, лучше у постели больного т.к. Во внешней среде гибнет. При заборе надо исключить контакта фекалий с дезинфектантами. В качестве консерванта: физ.рр + глицерин 3:1. Можно сразу сеять в среды обогащения (соляные среды). Посев делают на среды Эндо, Леви, Плоскирева (содержит соли желчных кислот и задерживается рост эшерихий). Растут лактозонегативными колониями. Колонии отвивают на среду Клиглера с последующий идентификацией. Виды определяют с помощью аглютинирующих сывороток. Все это идет 5 дней. Серологический: исследование сыворотки больного в реакции пассивной гемагглютинации, ко-аглютинации, РИФ. Аллергический: проба с дизентерином внутрикожная для определения инфекционной аллергии в предплечье ч/з 48 часов измеряют размер папулы (типичая реакция ГЗТ отвечают за нее лимфоциты) при положительном результате 10 мм. Неспецифическая: выявление больших, правильное содержание общественных и личных туалетов, мытье овощей и фруктов. Защита водоемов, хлорирование, кипячение воды. Специфическая профилактика отсутствует. Дизентерийные бактериофаги для профилактики контактных. Род Yersinia Виды: Y. Pestis (чума), Y. Pseudotuberculosis, Y. Enterocolitica, Y. Intermtdia (ирсиниозы кишечные). Общая характеристика: палочки, Г-, нет спор, овоидной формы (бочоночки), биполярно красящиеся, неподвижные (pestis), подвижные (Y. Pseudotuberculosis, Y. Enterocolitica), хорошо растут на простых средах, способны размножаться в почве, воде и накапливаться на окружающих растениях, психрофилы - растут при температуре от -2 до +40, оптимум +24, размножаются в холодильнике. Биохимические свойства: Лактоза- Глюкоза+ Газ- Сероводород- Цитрат натрия- Мочевина+ Индол- Подвижность+/- Экология: живут в организме грызунов, мышей, крыс, зайцев выделяются от грызунов с фекалиями, трупным материалом, мочой и загрязняют воду, почву и длительно там хранятся. Человек заражается алиментарным путем (поедая продукты питания). Течение заболевания: протекает как гастроэнтерит, часто поражаются мезентеральные лимфатические узлы, может вызвать аппендицит. Иногда развиваются генерализованные варианты → бактериемия, скарлатиноподобная сыпь, боли в суставах. Заболевание может принять длительное течение. Лабораторная диагностика: Бактериологический: посев материала (фекалии, пищевые продукты, кровь, моча. Делают посев на среды Эндо, Левина. Плоскирева при 25 0. Лактозонегативные колонии идентифицируют по б/х свойствам и антигенам. Серологический метод: сыворотка больного исследуется на специфические антитела в реакции непрямой гемагглютинации для этого добавляют эритроцитарный иерсиниозный диагностикум на Y. Pseudotuberculosis, Y. Enterocolitica в разведении 1:800. Профилактика: специфическая отсутствует. Вибрионы Семейство Vibrionacae Рода: Vibrio, Aeromonas, Plesiomonas Aeromonas, Plesiomonas высоко патогенно для гидробионтов, у человека вызывают гастоэнтериты. Cholerae Биовары:cholerae cholerae (classica) сholerae eltorO 1 Вид V. Cholerae (bengl)O 139 Все это вызывает холеру у человека и являются патогенными только для человека. Parahaemoliticus, V. Вызывают вибриозы которые могут протекать как гастроэнтероколит, раневая инфекция, отиты и сепсис. Общая характеристика. Изогнутая палочка в форме запятой, Г-, подвидная, имеет один жгутик, спор нет, капсул нет (искл. Cholerae (bengl)), морфологически нестабильны - могут превращаться в нитевидные и шаровидные формы, аэробы (факультативные анаэробы). Растут на простых питательных средах (очень быстро). Элективные среды: 1% пептонная вода, щелочной агар рН 8-9. ТСВS (тиосульфат-цитрат-бром-сахарозный агар), среды с телуидом. На жидкой среде пленка, на твердой мелкие колонии. Диапазон температуры +14 - +40. Биохимические свойства используются для родовой идентификации: Оксидаза+ Глюкоза окисление+ ферментация+ Индол+ Сероводород- Лизин/орнитин декарбоксилазная активность + Аргинин декарбоксилазная активность- Антигенные свойства. Связаны с наличием о-соматического антигена и Н-антигена. Для идентификации большое значение имеет значение О-антигена по которому внутри рода Vibrio и вида V. Cholerae различают от 1 до 139. О антиген термотстабилен. Возбудители холеры (classica, сholerae eltor) относятся к О 1 группе и bengl О 139. Другие вибрионы относятся ко 2,3,5,10 и т.д. Non О 1 или НАГ-вибрионы (не агглютинирующие О 1 и О 139 сыворотке) они не возбудители холеры. Н-антиген общий, термолябильный и большого значения для идентификации вибрионов не имеет. О-антиген липополисахарид белковой приводы и имеет в своем составе три фракции А, Б и С и в зависимости от сочетания фракций V. Cholerae classica и V. Cholerae сholerae eltor делятся на три серовара, между собой они биовары. Classica inaba (АС) agava (AB) hikojima (ABC) Eltor: inaba (АС) agava (AB) hikojima (ABC) Определение скеровара возбудителя имеет диагностическое значение если идентифицируется (в Индии) один серовар, а в Шри-Ланка тоже возбудитель, но другой серовар, то они друг с другом не связан. Серовары в bengae не выявляются. История открытий возбудителей. Первый возбудитель холеры - палочка Коха (classica) открыта в 1882 году из органов больного, второй возбудитель сholerae eltor в 1902 году из организма паломника на станции Эльтор в Индонезии, роль как возбудителя установлена в 1961 году, до этого не считался возбудителем холеры. В этом году установлено начало седьмой пандемии холеры. Это было связано со сменой классического возбудителя на холеру эльтор. Третий возбудитель (bengl) был выделен в 1992 году в Бангладеш. Он стал распространятся в юго-восточной Азии, индию. В 1993 году завезен в Россию в Ростов-на-Дону. Восьмая пандемия начавшись в 93 будет связана с этим возбудитетелем. Сейчас все случаи холеры связаны с Eltor, но его удельный вес уменьшается на Bengal. То есть возбудитель холеры постоянно меняется для него черезвычайно важна изменчивость морфологическая, патогенная. Поэтому среди возбудителей есть высоко патогенные штаммы (вызывают пандемии) и низко патогенные (вызывают легкие случаи). Факторы патогенности у возбудителей. Высокая подвижность, способность пробуравливать слизистый слой и адросбироваться на эпителиоцитов тонкого кишечника с помощью факторов адгезии и колонизации, продукция ферментов муциназа, нейроамидаза, лецитиназы, протеиназы. Главный фактор патогенности продукция экзотоксина - холерогена уникального по свойствам. Другие токсины энторотокиснов, эндотоксинов тоже обеспечивают токсические свойства. Холероген продуцируется специальным геном в сосаве генома бактериальной клетки - Vct-ген. Управляет этими генами два регуляторных гена: tox-ген и r-ген в структуре которых могут быть мутации, рекомбинации, что отражается на функции гена и делает организм возбудителем и способен вызывать эпидемии. Если регуляторные гены подверглись другим воздействием и что то отщепнулость от гена, то он не будет работать 'молчать'. Таким образом есть высокотоксигенные возбудители и низкотокисгенные. Обнаружить холероген у возбудителя можно методами: Биологический - проба на кроликах и котятах. Заражают → извлекают кишечник → смотрят на изменения. Иммуноферментный анализ Реакции непрямой гемагглютинации Обнаружение холерогена на клеточной культуре ткани - повреждает клетки. Генетический метод - ищут Vct-ген методом ПЦР или ДНК-зондов. Патогенез холеры. Источник: больной человек, бактерионоситель т.к. Животные не болеют Пути попадания: через рот Пути передачи: водный, пищевой, контактно-бытовой Инфицирующая доза: 10 9 -10 11 (содержится в 1 г фекалий) т.е. Надо несколько дней для заражения. Путь инфекции: желудок (кислая среда губительна - может дальше не резвится, если низкая кислотность, с водой или натощак барьер не срабатывает) → тонкий кишечник (щелочная среда - ему хорошо) → адсорбируется на ворсинка тонкого кишечника и начинает размножаться и выделяет все факторы патогенности, особенно холероген. Холероген определяет типические признаки холеры т.к. Это специфический экзотоксин. Холероген белок хорошо изучен, состоит из двух фракций (А и В). А - истинный токсин, а В не обладает токсическими свойствами она распознает рецепторы эпителия тонкой кишки, формирует поры в составе мембраны эпителиоцита и отвечает за проникновения А фракции. Затем А фракция имеет мишень аденилатциклазу (фермент отвечающий за переход АТФ в цАМФ) → накопление цАМФ → клетка теряет воду, соли Na, К бикарбонаты в просвет кишечника → нарушение водно-солевого баланса организма. Человек теряет много внутриклеточной жидкости, солей → жидкий стул (рисовый отвар), рвота → дегидратация (за сутки несколько литров, похудеть на 10 кг). Объем порянной жидкости и веса определяет степень дегидротации: степень - 3% степень - 5% (холерный гастроэнтерит) степень - 10% степень - 15% (стадия алгиды) Основное лечение: срочная нормализация водно-солевого баланса (струйно, капельно вводят растворы). В стуле нет лейкоцитов (нет воспаления), температура ниже нормы. Микробиологическая диагностика холеры. Основной метод диагностики: бактериологический т.к. Входит в группу особенно опасных. Исследованию подлежат: фекалии, промывные воды кишечника, рвотные массы, секционный материал тонкого кишечника, желчного пузыря. Вода, пищевые продукты, смывы с овощей и фруктов, смывы с рук персонала, забор материала делается специально-обученным персоналом и специальными методами защиты. Исследования проводится в лабораториях спец. Назначния час: засевания на слективные среды: 1% пептонная вода, щелочной агар, TCBS → термостат 37 0 - 3-4 часа →пересев на вторую ПВ, ЩА → 2 часа. Экспресс методы диагностики холеры: Исследование материала в реакции иммунофлуоресценции с О 1 -холерной сывороткой или О 139-й (первичного или вторичного). Постановка реакции аглютинации в препарате висячая капля + Иммобилизация холерного вибриона: висячая капля + О 1 сыворотка → прекращение подвижности. Часов: учет роста, отвивка подозрительной колонии на косой агар Клиглера, щелочного агара для выделения возбудителя. - 24 часа: рост чистой культуры и идентификация культуры. Идентификация: окраска по Грамму, изучение подвижности и установления принадлежности к роду по биотестам (оксидаза, ферментация глюкозы, проба на индол, сероводород). Дифференцировка: возбудителя от холероподобных вибриов по тестам: Реакция агглютинации по 1 и 139 сыворотке, отношение к триаде сахаров Хейберга (арабиноза -, сахароза +, манноза +, у подобных все +), отношение к фагам. -36 часов: устанавливается биологический вариант возбудителя (биовар): Холерный вибрионЭльторЛизабельностьЛизируется с 4 типом МукерджиЛизируется фагом Эльтор2Рост на агаре с полимексином ВНе растетРастетАгглютинация эритроцитов курицыНе аглютинируетАглютинируетРеакция фогес-проскауераОтрицательнаяположительная Установление серовара с помощью сывороток: inaba, agava. Серологический метод: определение парных сывороткам больного специфических антител в реакции пассивной гемагглютинации. Общаяя: выявление, изоляция, исследование воды, устройство туалетов, сан-просвет работа. Специфическая: холерная моновакцина - убитая взвесь возбудителей, холерная вакцина+анатоксин - приготовлена из холерогена, холерные бактериофаги (через рот), химиопрофилактика - терациклином, фуразалидолом. Возбудитель: Y. Pestis Особенности (для всех зооантропонозов): Источники: природная очаговость, высокопатогенны для животных (суслики, тушканчики, крысы) → источник животное. Распространение: воздушный, пищевой, контактно бытовой, трансмессивно. Пути попадания: кожа, слизистые (ЖКТ, глаз), сразу в кровь Клинические формы: кожная, кожно-бубонная, легочная, кишечная, септическая Особенности профилактики: ветеринарная профилактика (домашних и диких) включающая комплекс: дезинфекция, дезинсекция, дератизация. Pestis: палочка овоидной формы, биполярноокрашиваемая (центр белый), Г '-', спору не продуцирует, жгутиков не имеет, есть капсула. Растет на простых питательных средах (питательный агар, среда Эндо-Левина) дает колонии с шероховатыми краями, психрофильные микроорганизмы (25-28 0 ). Факторы патогенности: Антифагоцитарные: капсула, М-белок клеточной стенки блокируют фагоциты Продукция эндотоксинов (мышиный токсин) Выработка бактериоцинов - блокируют обменные процессы Продукция пестицинов - это снижает гуморальные факторы защиты (комплемент, белки крови) Б/Х свойства: Лактоза- Глюкоза+ Газ- Сероводород- Цитрат натрия- Мочевина+ Индол- Подвижность- Антигенные свойства: антигены капсулы и клеточной стенки. Патогенные свойства доказаны более чем на 200 видах животных. Особенно сурки, суслики, мыши, крысы, хомяки, белки. В природных условиях основным резервуаром являются грызуны. Выражена природно-очаговость. В организме грызунов возбудитель быстро размножается, передается трансмессивным путем (через кровососущих насекомых - блоха). Во внешней среде длительно сохраняется, длительно сохрашяется при низких температурах 0 градусов - 6 мес, в замороженном виде до 1 года, в почве до 5 месяцев. Подгибается при кипячении за 1 минуту, действуют сильные концентрации дезинфектантов за 5-10 минут. Pestis (лат) - чума, по английски - plaque, schuy (китайсикй) т.е распространена во всех странах. Известные эпидемии чумы: Густинианова (525 год), чума в Европе, Китае 14 век (в Смоленске выжило 5 человек), чума в Москве 1774 год. Очаги чумы до сих пор регистрируются в индии, Индокитае, Мадагаскаре, в России (Тува, горно-алтайская республика, прикаспийский округ, забайкальский округ), Казахстан. В этих очагах постоянно регистрируются случаи заболевания населения. Источник: больные грызуны, блохи, больной человек Пути передачи: воздушный, пылевой, пищевой, трансмессивный, контактно-бытовой. Входные ворота: кожа, слизистые Клинические формы: кожно-бубонная (некроз в лимфатическом узле), легочная форма (первичная, вторичная), септическая (первичная, вторичная) Летальность: более 60% Инкубационный период: 4-6 дней Течение заболевания: начало: острое, лихорадка, интоксикация, мышечная слабость, сильная головная боль, лицо гиперемированна, на коже в месте укуса пятно → папула → везикула → пустула → выход микроорганизмов. При бубонной форме бубон болезнен, гиперемирован, отечен сразу вовлекается несколько узлов → возникает конгломерат. При легочной форме возбудитель выделяется с мокротой. При септической форме на теле сыпь, заканчивается кровотечениями. Лабораторная диагностика: особо опасная карантинная инфекция → работа в очаге будет проводится только специальным персоналом в специальном снаряжении. Исследуемый материал - содержимое бубона, мокрота, кровь, трупный материал (человека, грызунов, блох), вода, почва, продукты. Методы: бактериоскопия, РИФ, иммуноферментный анализ, РНГА, термопреципитация, методы генетической диагностики. Бактериологический: посев на среды агар, Эндо-Левина, на среды с антибиотиками (для подавления другой микрофлоры), посев на среды с противочумным бактериофагом, на кровяные среды, среды с генциан фиолетом. Посевы инкубируют при температуре 25-28 градусов. На средах дает R и S - формы колоний. Изучаются морфологические свойства, биохимические свойства. Выделенная культура проверяется в биологической пробе на морских свинках. Наблюдение за природными очагами чумы. Продедение дератизации, дезинфекции и десинсекции. Специфическая профилактика у людей работающих в очагах, противочумных институтах, военных работающих с биологическим оружием - иммунизация живой противочумной вакциной из ЕV-штамма, химическая противочумная вакцина, в очагах чумы проводится химиопрофилактика с помощью антибиотика, противочумного иммуноглобулина. СИБИРСКАЯ ЯЗВА (ANTHRAX) Вызывает заболевание - B. Зооантропонозное заболевание острой природы при котором на коже человека образуется карбункул в центре которого черная точка (уголек). Заболевание древнее. Этиологию изучали Кох, Пастер, Цинковский. Возбудитель описан в 1849 году Полендером. Заболевание распространено во всех странах, но чаще с развитым скотоводством (крупный и мелкий рогатый скот). Животные заражаются пищевым путем с водой, травой в споровой форме. Основная клиническая форма - кишечная, возбудитель выделяется с фекалиями и переходит в спору и сохраняется десятки лет. Спора устойчива к температурам, дезинфектантам т. Почва и вода стновится резервуаром. Свойства возбудителя: палочки объединенные в цепочку, по морфологии стрептобацила, неподвижен, продуцирует капсулу (в живом организме) и спору (во внешней среде). Грамм +, факультативный анаэроб, хорошо размножается на простых средах, темпратурный оптимум 12 градусов, колонии R-формы. На среде с пенициллинов переходит в L-форму - т.е. Не продуцируют клеточную стенку Г- (форма жемчужного ожерелья). Эта способность используется для идентификации. Антигенные свойства: Капсульный антиген белковой природы Антигены клеточной стенки - термоустойчивые, можно изучить в реакции термокольципреципитации (р. Аскори) для обнаружения антигена в исследуемом материале, который кипятится, измельчается и исследуется. Экзотоксины на них образуются антитоксины. Факторы патогенности: Капсулообразование Продукция экзотоксинов: летальный (вызывает выработку рядов цитокинов - ИЛ1, фактора некроза опухолей), отечный (имеет белки, которые проникают внутрь клетки → блокируют работу клеток). Семейство: Micobacteriacae, Actinomicetae, Streptomicetae Род: Micobacterium Вид: M. Tuberculosis, M. Africanus (возбудители туберкулеза человека), M, leprae (возбудители лепры у человека) (более 160). Другие микобактерии: не туберкулезные микобактерии (НТМБ) - xenopi, ulcerens, micoti, folturitum, avium (вызывают микобактериозы - кожи, с/о, суставов, лимфотических узлов), smegmatis (сапрофит). Широко распространены в окружающей среде - почве, среде, растениях. Есть высокопатогенные, условнопатогенные, сапрофиты. Особенности микобактерий. Особый химический состав микобактерий: много липидов, жиров, воска, жирных кислот (миколовая, фтиоидная, туберкулиностеариновая). Биосвойства микобактерий: Устойчивость к кислотам, щелочам, спиртам Трудно окрашиваются обычными красителями, красятся концентрированными красками с подогреванием Методы выявления - окраска по Циль-Нильсону Высокорезистентны в окружающей среде (в мокроте до нескольких недель) Особые патогенные свойства: нет адгезинов, истинных токсинов, ферментов патогенности. Сами компоненты клеточной стенки и цитоплазмы (миколовая, фтиоидная кислота, фракции липидов) оказывают токсическое действие на ткани и ткань образует специфическую гранулему. Главный фактор гликолипид или 'корд-фактор', который является токсическим с помощью этого фактора микобактерии присоединяются к ткани и связывается с ней, защищаются от фагоцитоза, блокирует процессы окислительного фосфолирирования в митохондриях. КФ прежде всего поражает макрофаги т.к. В нем не переваривается. Микобактерии вызывают ответную реакцию иммунной системы в виде ГЗТ. Классификация микобактерий по Району. По патогенности: Патогенные Условно-патогенные Сапрофитические По скорости роста: Быстрорастущие (колонии до 7 дня) - smegmatis и еще 17 Медленнорастущие (через 2 и более недели до 6 месяцев) - M. Tuberculosis, M. Africanus и еще 17 Не растущие - M, leprae (культивируется только на броненосцах) По способности к образованию пигментов: Фотохромогенные (на свету) Скотохромогенные (на свету и в темноте) По способности к синтезу никотиновой кислоты: Положительные - M. Tuberculosis Отрицательные - M. Bovis Возбудители туберкулеза. Tuberculosis открыт Кохом в 1882 году. Носит название ВК - бактерия Коха. Морфологические свойства. Прямые или изогнутые палочки, M. Bovis - толстенькие короткие, M. Avium - длинные цепочкой. Напоминают мицелий гриба. Спор -, капсулы нет, жгутиков нет. Морфологически изменчив под действием лекарств - может переходить в кокковые формы. Кислото, щелоче - устойчивы. Хорошо красится флюорохромными красителями ауронином, родомином → можно обнаружить с помощью прямой флюоресценции. Культуральные свойства. Аэробы, факультативные анаэробы, размножаются медленно - скорость деления 14-18 часов → колонии мы увидим через несколько недель. Питательные среды: глицериновые, картофельно-глицериновые яичные среды (Левейнштейна-Иенсена) + железо, фосфор, сера, факторы роста (биотин, никотиновая кислота, незаминимые аминокислоты) синтетические, полусинтетические Характер роста: единичные колонии, морщинистые, пигментированные, крошатся, трещат при прокаливании Резистентность: быстро вырабатывается ко многим препаратам благодаря R-плазмиде. Устойчивость есть первичная (у микобактерий выделенных от больных которые никогда не лечились), вторичная (формируется в процессе лечения и составляет).
0 Comments
Leave a Reply. |
AuthorWrite something about yourself. No need to be fancy, just an overview. Archives
August 2018
Categories |